敗血症による頻脈性心房細動におけるCRACチャネルの役割

CRAC 通道在脓毒症诱发的心动过速性房颤中的作用

• 批准号: 21K16551
• 负责人: 日野 秀樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University (2022)Osaka City University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16551/
• 关键词: 敗血症; 不整脈; 心房細動; チャネル

本研究の目的は不整脈の基質を形成する細胞内カルシウム過負荷と関連するCalcium-release activated calcium(CRAC)チャネルを抑制することにより、敗血症によって起こる致死的不整脈が抑制されるか否かを検証することである。本年度は主にwhole animal、摘出心を用いた実験を行った。マウスの摘出心をランゲンドルフ装置にマウントした場合マッピングが困難であったため、予備実験と同様にラットの摘出心をランゲンドルフ装置にマウントし実験を行った。その結果、LPS（1.5mg/kg）投与48時間経過したラット摘出心において不整脈誘発ペーシングを行うことでおおよそ60%以上の確率で有意な不整脈が誘発された。一方で、LPSを投与していないコントロール群では有意な不整脈の発生頻度は10％未満であった。引き続きCRACチャネルを阻害した場合での発生頻度を検証している。心臓を摘出する際に採取した血液検査により、LPS投与によって乳酸値上昇、血清クレアチニン値上昇を認めておりLPS投与による抗炎症モデルであることを確認している。それに並行して、CRACチャネルであるOrai1チャネルを心臓特異的にノックアウトしたマウスを作成し、繁殖を安定させることが可能となった。コントロールのマウス、心臓特異的Orai1ノックアウトマウスそれぞれにLPSを腹腔内投与し、48時間後に右内頚静脈より1フレンチの4電極ペーシングワイヤーを心臓まで挿入し、不整脈誘発ペーシングを行うことで有意な不整脈の誘発率を比較している。

这项研究的目的是验证脓毒症引起的致命性心律失常是否可以通过抑制钙释放激活钙（CRAC）通道来抑制，CRAC 通道与细胞内钙超载有关，而细胞内钙超载是心律失常的基础。今年我们主要用整只动物和离体心脏进行实验。由于当将小鼠心脏安装在Langendorff装置中时绘图是困难的，因此如预实验中那样通过将大鼠心脏安装在Langendorff装置中来进行实验。结果，在给予LPS(1.5mg/kg)48小时后，通过在离体大鼠心脏中进行心律失常诱导起搏，以大约60%或更高的概率诱发显着心律失常。另一方面，在未施用LPS的对照组中，显着心律失常的频率低于10％。我们正在继续验证 CRAC 通道被抑制时发生的频率。摘除心脏时进行的血液检查显示，LPS 给药会增加乳酸和血清肌酐水平，证实 LPS 给药是一种抗炎模型。与此同时，他们创造了小鼠，其中 CRAC 通道 Orai1 以心脏特异性方式被敲除，并且能够稳定繁殖。对照小鼠和心脏特异性Orai1基因敲除小鼠腹腔注射LPS，48小时后，将1根French 4电极起搏线通过右颈内静脉插入心脏，进行心律失常诱导起搏，检测显着性心率失常。比较心律失常的诱导率。