EGFR遺伝子変異陽性pN1-2肺癌術後の予後に関するシグナル経路・分子の解明

EGFR基因突变阳性pN1-2肺癌术后预后相关信号通路和分子的阐明

• 批准号: 21K16519
• 负责人: 伊坂 哲哉
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kanagawa Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16519/
• 关键词: 逆相蛋白質アレイ解析; EGFR遺伝子変異陽性肺癌; tissue microarray; EGFR; TKI

逆相蛋白質アレイ解析(RPPA)による病理学的にリンパ節転移を有する(pN(+)) EGFR L858R点突然変異陽性肺癌 (Ex21)で特異的に活性化するシグナル因子を同定すべく, EGFR exon19 deletion変異陽性肺癌(Ex19)を含めた症例の選抜, 新規の抗体選定, 少数例でのRPPA解析を行ってきた。今まで少数例 (Ex21 10例, Ex19 7例)を用いてRPPA解析を行い, 解析条件の検討を行った.昨年は対象とするEGFR遺伝子変異肺癌症例選定を増やし, Ex21 66例, Ex19 63例, 合計129例を再選抜した. これまでEGFR/MAPK経路, PI3K-AKT経路に関連した16種の抗体を選定したが, 今年度は新たにRBM10抗体, PD-L1抗体, p53抗体を追加選抜した. この3つ抗体の臨床的な意義を確認すべく, pN(+) Ex21およびpN(+)Ex19のEGFR遺伝子変異陽性肺癌129例のtissue microarrayを作成した. RBM10の役割の解明目的に,作成したtissue microarrayを用いてRNAscopeによるRNA in situ hybridizationにてRBM10の局在を確認した.今年度3つの抗体とpN(+)EGFR遺伝子変異陽性肺癌の予後との関連性およびEGFR-TKIへの奏効性との関連性の解析結果が得られたので, 本結果については論文作成中である. 今後は追加したこれら新規抗体を用いてpN(+)Ex21で活性化している蛋白を網羅的に解析し, 予測した悪性化進展シグナル経路の妥当性を多症例で検証していく予定である. そして引き続きpN(+)Ex21変異肺癌に特異的に発現する蛋白質をターゲットとした治療薬の開発を目指していく予定である.

为了通过反相蛋白芯片分析（RPPA）鉴定EGFR L858R点突变阳性肺癌（Ex21）病理性淋巴结转移（pN（+））中特异性激活的信号因子，EGFR外显子19我们选择了病例包括缺失突变阳性肺癌（Ex19），筛选出新的抗体，并对少数病例进行了RPPA分析。到目前为止，我们仅使用少量病例（Ex21 10例，Ex19 7例）进行RPPA分析，并检查分析条件。去年，我们增加了EGFR基因突变肺癌病例的选择，66例Ex21和Ex19共63例，至此共筛选出16种与EGFR/MAPK通路和PI3K-AKT通路相关的抗体。今年，我们另外选择了RBM10抗体、PD-L1抗体和p53抗体，为了证实这三种抗体的临床意义，我们对pN(+) Ex21和pN(+) Ex19的EGFR基因突变进行了阳性检测。我们创建了 129 个肺癌病例的组织微阵列，为了阐明 RBM10 的作用，我们使用创建的组织微阵列使用 RNAscope 进行 RNA 原位分析。我们通过杂交确认了RBM10的定位。今年，我们获得了三种抗体与pN(+)EGFR基因突变阳性肺癌预后的关系以及与EGFR-TKI反应的关系的分析结果。目前正在准备一篇关于这些结果的论文。将来，我们将使用这些新抗体全面分析 pN(+)Ex21 激活的蛋白质。我们计划在大量病例中验证预测的恶性进展信号通路的有效性。我们还将继续计划开发针对pN(+)Ex21突变型肺癌中特异性表达的蛋白质的治疗药物。