マウス小腸移植モデルを用いた小腸移植後抗体関連型拒絶反応の発症機序と治療法の解明

使用小鼠小肠移植模型阐明小肠移植后抗体相关排斥反应的发病机制和治疗

基本信息

批准号：
21K16401
负责人：
松島肇
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

MHCハプロタイプの異なる25-30gのマウス間で同種異系間移植を行った。B6マウスの皮膚8-10x10mm^2をC3Hマウスの背部に移植した。2週間後、C3Hマウスの末梢血を採取し、B6のsplenocytes(0.5x10^6)と室温で反応させ抗体価(IgG)をフローサイトメトリーにてMFIを測定し、抗体価が上昇していることを確認した。B6マウスの回腸を10cm長採取し、皮膚移植後2週間目のC3Hマウスに異所性小腸移植を行った。移植後2日目、4日目、7日目でグラフト摘出し、急性拒絶反応の程度を皮膚移植を行っていないマウスと比較評価した。皮膚移植により前感作させたマウスに小腸を移植するとコントロールと比較して移植後2日目では急性拒絶反応に差は認められなかったが、4日目、7日目では拒絶反応が促進され、抗体関連型拒絶が誘発されていることが示唆できた。移植後4日目のグラフトの免疫染色では皮膚移植により前感作させて群で補体C3の血管壁への沈着の有意な増加やCD20陽性細胞の粘膜固有層への浸潤促進が見られた。今後、抗CD20抗体などで抗体産生する効果のある薬剤を投与することでいかに抗体関連拒絶が制御できるかについても検討予定である。

在具有不同MHC单倍型的25-30G小鼠之间进行同种异体移植。将B6小鼠的皮肤8-10x10mm^2植入C3H小鼠的背部。两周后，收集了来自C3H小鼠的外周血，在室温下与B6的脾细胞（0.5x10^6）反应，并通过流式细胞仪测量抗体滴度（IgG），以确认抗体滴度是否增加了。收集10厘米长的B6小鼠的回肠，并在皮肤植入后两周对C3H小鼠进行异位小肠移植。在植入后的第二，第四和第七天去除移植物，并将急性排斥的程度与没有接受皮肤移植的小鼠进行了比较。当皮肤移植养生的小鼠与对照组相比，植入后的第二天未观察到急性排斥的差异，但在第4天和第7天促进了排斥反应，这表明诱发了与抗体相关的排斥反应。植入后的第四天，移植物的免疫染色显示，补体C3对组中血管壁的沉积显着增加，并且观察到CD20阳性细胞促进到固有层中。将来，我们还将考虑如何通过施用有效产生抗体（例如抗CD20抗体）的药物来控制与抗体相关的排斥反应。