Preserensitization therapy for ABO incompatible organ transplantativation of post-vaccination immunity by selective blockade of B lymphocytes in deson

ABO血型不合器官移植的预致敏疗法通过选择性阻断B淋巴细胞来实现疫苗接种后免疫

• 批准号: 21K16412
• 负责人: 森本 博司
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Department of Clinical Research, National Hospital Organization Kure Medical Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16412/
• 关键词: ワクチン; 臓器移植; 血液型不適合; 脱感作療法; リツキシマブ

ABO血液型不適合臓器移植では、術前脱感作療法による抗血液型抗体産生細胞の抑制が不可欠であり、抗CD20モノクローナル抗体（リツキシマブ）を使用するプロトコールがスタンダードとなっている。しかし、リツキシマブによる非特異的なB細胞の抑制状態は術後も長期にわたって続くため、ワクチンによる免疫獲得能は著明に低下する。そこで、リツキシマブの代わりに抗CD1d抗体を用いて血液型抗体産生に関わるB細胞サブセットのみを特異的にブロックすることにより、抗血液型抗体の抑制を維持しつつワクチンによる免疫獲得能を保持できる可能性を探るのが本研究の目的である。抗CD1d抗体投与により血液型抗体産生を抑制し、かつワクチンの効果が保持されるという仮説を証明するため、以下のような検討を行う予定である。①抗体価測定系の確立（2023年度）野生型C57BL/6マウスにヒト赤血球と、仮想不活化ワクチンとして卵白アルブミン（OVA）を免疫し、抗血液型抗体、抗OVA抗体を測定する系を作成する。②抗CD1d抗体投与と抗体価測定、フェノタイプ解析（2023年度）C57BL/6マウスを3グループに分け、それぞれにIsotype control、抗CD20抗体（リツキシマブ）、抗CD1d抗体を投与（Day0）した後、ヒトA型赤血球とOVAで2回免疫を行う（Day1, Day8）。免疫後2週（Day22）、6週（Day50）で抗A抗体・抗OVA抗体の産生状況を確認する。末梢血中B細胞フェノタイプ解析も同時に行う。ワクチンとして、H-2Kb拘束性OVA由来の抗原ペプチドと免疫賦活剤とエマルジョン化し、C57BL/6マウスに腹腔免疫する。また、T-Select H-2Kb OVA Tetramer(TS-5001-1C)を用い、CD8陽性細胞中のTetramer陽性細胞率（%）を評価する。

在ABO血型不相容的器官移植中，必须通过术前脱敏治疗抑制抗血型抗体产生细胞，标准方案是使用抗CD20单克隆抗体（利妥昔单抗）。但利妥昔单抗引起的B细胞非特异性抑制在手术后持续较长时间，疫苗获得免疫的能力明显降低。因此，通过使用抗CD1d抗体代替利妥昔单抗，仅特异性阻断参与血型抗体产生的B细胞亚群，可以在维持对抗血型抗体的抑制的同时，维持疫苗获得免疫的能力。这项研究的目的是探索性别。为了证明施用抗CD1d抗体可以抑制血型抗体产生并维持疫苗功效的假设，我们计划进行以下研究。 ①抗体滴度测定系统的建立（2023财年） 用人红细胞和卵清蛋白（OVA）作为虚拟灭活疫苗免疫野生型C57BL/6小鼠，建立测定抗血型抗体和抗OVA抗体的系统。做。 ②抗CD1d抗体给药、抗体滴度测定和表型分析（2023）C57BL/6小鼠分为3组，每组给予同型对照、抗CD20抗体（利妥昔单抗）和抗CD1d抗体后（第0天），用人A型红细胞和OVA进行两次免疫（第1天、第8天）。免疫后2周（第22天）和6周（第50天）检查抗A抗体和抗OVA抗体的产生状况。同时还将进行外周血B细胞表型分析。作为疫苗，将源自H-2Kb限制性OVA的抗原肽与免疫刺激剂乳化，并对C57BL/6小鼠进行腹膜内免疫。此外，使用 T-Select H-2Kb OVA 四聚体 (TS-5001-1C) 评估 CD8 阳性细胞中四聚体阳性细胞率 (%)。