Muse細胞を用いた高効率な膵島移植法の確立

Muse细胞高效胰岛移植方法的建立

• 批准号: 21K16391
• 负责人: 會田 直弘
• 金额: $ 1.25万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16391/
• 关键词: 膵島移植; 1型糖尿病; 臓器移植; Muse細胞; 間葉系幹細胞; 再生医療; 糖尿病

研究2年目である本年は、ラット膵島とMuse細胞の共移植を目指した。まず共移植に用いるラットMuse細胞の分離であるが、抗体などを変更しても十分量の収量を得ることが困難であった。研究期間中に十分量を得るための分離法を樹立することは困難と考え、Muse細胞の抗原性が低いことに着目し、共移植するMuse細胞をヒトMuse細胞に変更することとした。また、投与するラット膵島の至適量を検討するため、200-250gの糖尿病ラットに対し、200 islets(n=5)、300 islets(n=5),600 islets(n=5)を移植し、糖尿病改善率を検討した。それぞれの糖尿病改善率は200 islets 0%、300 islets 40%、600 islets 100%であった。これより300 isletsの膵島との共移植を行い、糖尿病改善率が向上するか否かを検討する方針とした。次に、共移植を行うMuse細胞数を再検討した。Muse細胞はMSC内に1％程度含まれる細胞である。既報では10^7 cellsのMSCで十分な効果が示されていることから、Muse細胞の最大投与量は10^5 cellsとした。コントロールのためヒトMSCを用いて予備実験を行った。10^5 cells(n=3)、10^4 cells(n=2)のヒトMSCとラット膵島(300islets)を共移植したところ、10^5 cellsは60%が糖尿病改善、10^4 cellsの糖尿病改善率は0%であった。MSCとしても10^5 cellsで効果が得られる可能性があり、より少ない10^4 cellsのMuse細胞との共移植を行うことにした。次年度は上記の条件を用いてラット膵島とヒトMuse細胞の共移植を行う予定である。

今年是该研究的第二年，目标是大鼠胰岛和 Muse 细胞的联合移植。首先，我们分离了用于共移植的大鼠Muse细胞，但即使我们改变抗体也很难获得足够量的细胞。考虑到研究期间难以建立分离方法获得足够的数量，我们针对Muse细胞抗原性低的问题，决定将共移植的Muse细胞改为人Muse细胞。此外，为了检查大鼠胰岛的最佳施用量，将200个胰岛（n=5）、300个胰岛（n=5）和600个胰岛（n=5）移植到体重为200-500g的糖尿病大鼠中。调查250g的糖尿病改善率。 200个胰岛的糖尿病改善率分别为0%、300个胰岛的糖尿病改善率为40%、600个胰岛的糖尿病改善率为100%。从现在开始，我们决定将300个胰岛与胰岛联合移植，并检查糖尿病改善率是否会提高。接下来，我们重新考虑了共移植的 Muse 细胞数量。 Muse 细胞是大约 1% 的 MSC 中包含的细胞。之前的报道已经显示出10^7个MSC细胞就有足够的效果，因此Muse细胞的最大剂量设定为10^5个细胞。使用人类 MSC 作为对照进行了初步实验。当10^5个细胞（n=3）和10^4个细胞（n=2）的人间充质干细胞和大鼠胰岛（300个胰岛）共移植时，10^5个细胞中有60%改善了糖尿病，而10^4个细胞则改善了糖尿病。细胞显示糖尿病改善率为0%。由于 MSC 有可能对 10^5 细胞有效，因此我们决定将它们与较少数量的 10^4 Muse 细胞共移植。明年，我们计划利用上述条件进行大鼠胰岛和人Muse细胞的联合移植。