脂肪細胞が分泌するアディポカインを軸とした全身性強皮症の病態解析

以脂肪细胞分泌的脂肪因子为中心的系统性硬皮病的病理分析

• 批准号: 21K16284
• 负责人: 宮川 卓也
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16284/
• 关键词: 全身性強皮症; 脂肪細胞; アディポカイン

全身性強皮症の病態に関与が示唆されるも詳細が分かっていないアディポカインの病態解析を行うため、全身性強皮症様の線維化と血管障害を自然発症する脂肪細胞特異的Fli1欠損マウス（Fli1 AdipoKOマウス）より脂肪細胞を単離して、アディポカインの発現パターンをコントロールマウスと比較した。12週齢のFli1 AdipoKOマウスならびにコントロールマウスの精巣周囲の脂肪を摘出後ミンスし、コラゲナーゼ処理後、ろ過、遠心を行い、脂肪細胞を回収した。コラゲナーゼ処理の時間や遠心する時間など細かく条件をかえ、一番よい純度の脂肪細胞に関してシーケンサーを用いて網羅的に解析し、昨年と同様、再度検討を行った。これまでに全身性強皮症と関連があると言われていたアディポネクチン、ビスファチン、レジスチン、リポカリン２、オメンチンなどのアディポカインに関してはFli1 AdipoKOマウスとコントロールマウスに関して有意差は見られなかったものの、同じく関連があると言われていたIL-6に関してはFli1 AdipoKOマウス脂肪細胞で上昇している傾向が見られた。また皮下脂肪が付着した皮膚組織で免疫組織学的検討を行うことで、Fli1 AdipoKOマウスの脂肪細胞ではIL-6が有意に上昇していることを確認した。Fli1 AdipoKOマウスでは、骨髄内脂肪細胞が骨髄由来間葉系幹細胞(BM-MSCs)に作用し未熟な周皮細胞を形成することで血管障害を起こしていることが示唆されている。in vitroでIL-6のsiRNAをFli1 AdipoKOマウスのBM-MSCｓに添加しBM-MSCsのフェノタイプがコントロールマウスと同等になることを確認した。

进行脂蛋白的分析，这表明它参与了全身性硬皮病病理学，但细节未知，从脂肪细胞特异性的FLI1缺陷小鼠（FLI1 adipoko Mitial）中分离出脂肪因子（FLI1 adipoko MITE），这些小鼠（FLI1 adipoko Miqu）自发地形成了类似于全身性粘膜状的纤维化纤维蛋白和流动性的蛋白酶，并表达了蛋白酶。去除，切碎，用胶原酶处理，过滤和离心以收集脂肪细胞的睾丸周围的睾丸周围的脂肪和对照小鼠的睾丸和对照小鼠的睾丸周围。在详细更改条件之后，例如胶原酶处理的时间和离心时间，使用序列仪对具有最佳纯度的脂肪细胞进行了全面分析，并且与去年相同，结果重新检查了结果。尽管对于脂联素，biffatin，抗素，lipocalin 2和omentin等脂肪因子没有发现显着差异，这些脂肪因子与以前据说与全身性硬皮病有关，但FLI1 adipoko小鼠倾向于与adipoko小鼠在IL-6中升高的adipoko小鼠，这也与IL-6相关，这与Systyicsic cordema相关。此外，对具有皮下脂肪的皮肤组织进行了免疫组织化学研究，并证实，FLI1 Adipoko小鼠的脂肪细胞中IL-6显着增加。有人提出，乳腺癌作用于骨髓来源的间充质干细胞（BM-MSC）并形成未成熟的周细胞，从而在FLI1 Adipoko小鼠中引起血管损伤。在体外，将IL-6的siRNA添加到FLI1 Adipoko小鼠的BM-MSC中，并确认BM-MSC的表型与对照小鼠的表型相当。