動物モデルに基づく乾癬における尿酸の作用およびその分子メカニズムの解明

基于动物模型阐明尿酸对银屑病的影响及其分子机制

基本信息

批准号：
21K16217
负责人：
木村佳貴
金额：
$ 3万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16217/
关键词：
尿酸乾癬 IL-17 AMP活性化キナーゼ

项目摘要

尿酸と乾癬の関与について、低尿酸モデルマウス（ウリカーゼトランスジェニックマウス）を用いて、検討した。イミキモド誘導性乾癬様皮疹の重症度の低下を、PASIスコアを用いた臨床的評価にて、低尿酸モデルマウスでは炎症の抑制がみられた。また病理学的にも、表皮の肥厚の有意な抑制をみとめた。そのメカニズムについて検討を行い、低尿酸モデルマウスでのRT-PCRでのIL-17A/Fの発現低下を認めた。そこで表皮・真皮でのTh17細胞の浸潤を評価を行った。表皮・真皮のリンパ球を分離し、フローサイトメトリーにてCD3+細胞（T細胞)のうち、IL-17A産生T細胞の割合を検討したところ、低尿酸モデルマウスを用いて評価を行い、IL-17A産生T細胞の有意な減少をみとめた。またこのIL-17A陽性細胞がTh17への分化が抑制されているのか、皮膚への遊走が抑制されているかを検討した。脾臓よりナイーブCD4陽性T細胞を分離し、尿酸存在の有無によって、抗CD3抗体、抗CD28抗体、IL-6, TGF-βによる刺激によって、in vitroでTh17へと分化させ、その分化の程度をフローサイトメトリーで評価した。この結果では尿酸はTH17への分化を促進させないことが判った。in vivoでもリンパ節・脾臓でのIL-17A産生細胞数は低尿酸モデルマウスとコントロールマウスで差は見られなかった。皮膚病変におけるケモカインの発現量を検討したところ、低尿酸モデルにおいて、ケモカインの発現の低下がみられた。ケモカインの発現低下への尿酸の作用について、検討を進めている。

使用低尿酸模型小鼠（尿酸酶转基因小鼠）研究尿酸与银屑病之间的关系。使用 PASI 评分对咪喹莫特诱导的牛皮癣样皮疹严重程度的降低进行了临床评估，并且低尿酸模型小鼠的炎症受到抑制。此外，在病理学上，观察到表皮增厚的显着抑制。我们研究了其机制，发现通过 RT-PCR 在低尿酸模型小鼠中 IL-17A/F 表达降低。因此，我们评估了Th17细胞在表皮和真皮中的浸润情况。分离表皮和真皮的淋巴细胞，并使用流式细胞术检查CD3+细胞(T细胞)中产生IL-17A的T细胞的比例，观察到产生17A的T细胞显着减少。我们还研究了这些 IL-17A 阳性细胞向 Th17 细胞的分化或它们向皮肤的迁移是否受到抑制。从脾脏中分离出初始 CD4 阳性 T 细胞，并根据是否存在尿酸，通过抗 CD3 抗体、抗 CD28 抗体、IL-6 和 TGF-β 刺激，在体外分化为 Th17 细胞。并通过流式细胞术评价分化程度。这些结果表明尿酸不促进分化为TH17。在体内，低尿酸模型小鼠和对照小鼠的淋巴结和脾脏中产生IL-17A的细胞数量没有观察到差异。当我们检查皮损中趋化因子的表达水平时，我们发现在低尿酸模型中趋化因子表达降低。我们目前正在研究尿酸对减少趋化因子表达的影响。