マスト細胞と発汗の相互作用の研究

肥大细胞与出汗之间相互作用的研究

基本信息

批准号：
21K16204
负责人：
飯田忠恒
金额：
$ 3万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16204/
关键词：
発汗マスト細胞自律神経神経免疫蕁麻疹組織透明化

项目摘要

皮膚のマスト細胞の活性化は蕁麻疹を引き起こすが、その病型の一つに発汗刺激により症状が誘発されるコリン性蕁麻疹がある。コリン性蕁麻疹は一般的な蕁麻疹治療が無効な例が多く、発汗障害を合併する場合もある。汗抗原へのアレルギーを示す症例が報告されている一方で、アレルギーのない症例ではIgE非依存的にマスト細胞が活性化している可能性も考えられる。本研究はマスト細胞のIgE非依存的な活性化に着目し、難治性のコリン性蕁麻疹に対する新たな治療ターゲットを見つけ出すことを目的とする研究である。本年度は、イメージングやRNA-seqによるマスト細胞の評価系を確立することを目標に研究を進め、おおむね予定通りの成果が得られている。イメージングによる評価については、マスト細胞をアビジンで染色することで3次元イメージングを行う手法を、ヒトおよびマウスの汗腺で確立した。神経との同時染色では、神経に近接するマスト細胞が認められた。抗c-kit抗体を用いたフローサイトメトリーによるマスト細胞の単離は、陽性細胞がごく少数しか認められず採集が困難であったため中止したが、マウス汗腺のシングルセルRNA-seqに成功し、マスト細胞集団を分離して網羅的な遺伝子発現量評価が可能なことを確認した。さらに、マスト細胞の活性化および欠損による発汗への影響を評価した。マスト細胞をIgE非依存的に活性化したマウスでは明らかな発汗への影響は見られなかったが、マクロファージを活性化させると発汗が低下し、マスト細胞にも遺伝子発現量に変化が生じることがわかった。また、マスト細胞欠損マウスでも発汗には明らかな影響は見られず、マクロファージの活性化による発汗低下も認められたことから、発汗への影響はマスト細胞よりもマクロファージの活性化の影響が大きい可能性が示唆された。

皮肤中肥大细胞的激活引起荨麻疹，其病理类型之一是胆碱能荨麻疹，其症状是由汗液刺激引发的。很多胆碱能性荨麻疹病例，一般荨麻疹治疗无效，还可能并发出汗障碍。虽然已有对汗液抗原过敏的病例报道，但在非过敏病例中，肥大细胞也可能以不依赖 IgE 的方式被激活。本研究重点关注肥大细胞的IgE非依赖性激活，旨在寻找顽固性胆碱能荨麻疹的新治疗靶点。今年，我们一直在进行研究，目标是利用成像和RNA-seq建立肥大细胞评估系统，结果大致按计划进行。关于成像评估，我们建立了一种通过用亲和素对肥大细胞进行染色来对人和小鼠汗腺进行3D成像的方法。与神经共染色显示肥大细胞靠近神经。由于仅观察到少量阳性细胞且收集困难，使用抗C-kit抗体通过流式细胞术分离肥大细胞已停止，但我们证实小鼠汗腺的单细胞RNA-seq是成功的。通过分离肥大细胞群可以全面评估基因表达水平。此外，我们评估了肥大细胞激活和缺失对出汗的影响。在以不依赖 IgE 的方式激活肥大细胞的小鼠中，对出汗没有明显影响，但巨噬细胞的激活减少了出汗，并且还引起肥大细胞基因表达水平的变化。此外，即使在肥大细胞缺陷的小鼠中，对出汗也没有明显的影响，并且还观察到由于巨噬细胞活化而减少的出汗，因此表明巨噬细胞活化对出汗的影响可能比肥大细胞的影响更大。。