Research for predictive indicators of therapeutic response of beta-adrenergic receptor blockers using myocardial tissue of patients with heart failure

利用心力衰竭患者心肌组织研究β-肾上腺素能受体阻滞剂治疗反应的预测指标

• 批准号: 21K16031
• 负责人: 中野 知哉
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16031/
• 关键词: 非虚血性拡張型心筋症; 心筋組織検体; β-アドレナリン受容体シグナル; 免疫組織学的評価; 心筋組織; 免疫組織学; RNAシーケンス

本年度は、研究2年目として、非虚血性拡張型心筋症（NIDCM）患者の心筋組織検体を用いたβ-アドレナリン受容体（AR）シグナル動態評価のうち、（１）免疫組織学的解析と（２）パラフィン包埋心筋組織検体からRNAを抽出する実験を行った。（１）に関しては、臨床および組織学的にNIDCMと診断され新規にβ-AR遮断薬を導入された患者のパラフィン包埋心筋組織検体を用いて、心筋細胞におけるGタンパク質依存的β-ARシグナル動態評価を行った。本研究では、同シグナル伝達経路の下流因子であるGタンパク質共役受容体キナーゼ2、β-arrestin2とcAMP応答配列結合タンパク質のリン酸化に対する抗体を用いて免疫染色を行い、心筋細胞におけるこれら因子の発現だけでなく局在を免疫組織学的に評価した。まず、NIDCM患者の心筋細胞におけるβ-ARシグナル動態評価のため、NIDCM患者と正常心機能患者におけるGタンパク質依存的β-ARシグナル動態の差異について検討を進めた。次に、NIDCM患者のβ-AR遮断薬に対する反応性を予測する有用な指標を探索するため、β-AR遮断薬導入後の左室逆リモデリングの有無でNIDCM患者を層別化し、両群間の臨床所見を比較検討するだけでなく、心筋細胞におけるGタンパク質依存的β-ARシグナル動態の差異を免疫組織学的にも検討した。（２）に関しては、心筋細胞におけるβ-arrestins依存的β-ARシグナル動態をRNAシーケンス解析で評価するため、パラフィン包埋心筋組織検体からRNAを抽出する実験を行った。昨年度内にパラフィン包埋剖検心筋組織検体からRNAを抽出する予備実験を行いRNA抽出に成功したため、本年度は正常心機能患者とNIDCM患者を数例ずつ選択し、約3mmと非常に小さいパラフィン包埋組織からRNAを抽出する実験を行った。

今年，作为研究的第二年，我们进行了一个实验，其中（1）（1）免疫组织学分析和（2）从石蜡包裹的心肌组织中提取RNA的非缺血性心肌病（NIDCM）患者的患者。关于（1），使用临床和组织学诊断为NIDCM并新引入的β-AR阻塞剂的患者的石蜡膜的心肌组织标本评估了心肌细胞中G蛋白依赖性的β-AR信号动力学。在这项研究中，使用针对G蛋白偶联受体激酶2，β-arrestin2和CAMP反应结合蛋白的磷酸化的抗体进行免疫染色，信号传导途径的下游因素，以及免疫化学评估这些因子的表达和局部性。首先，为了评估NIDCM患者心肌细胞的β-AR信号动力学，我们研究了NIDCM患者与患有正常心脏功能的患者的G蛋白依赖性β-AR信号动力学的差异。接下来，为了探索有用的指标，以预测NIDCM患者对β-AR阻滞剂的反应性，我们对NIDCM患者进行了分层，并在诱导β-AR阻滞剂诱导后存在或不存在反向左心室重塑，不仅在两组之间进行了临床发现，而且比较了两组之间的临床发现，还比较了蛋白质依赖性β-依赖性β-依赖性β-依赖性β-依赖性β-kin依赖性的差异。关于（2），为了使用RNA测序分析评估心肌细胞中β-arrestin依赖性的β-AR信号动力学，进行了一个实验，以从石蜡包含的心肌组织样品中提取RNA。去年，我们进行了一个初步实验，以从石蜡包裹的心肌组织样品中提取RNA并成功提取RNA。今年，我们选择了几名患有正常心脏功能和NIDCM患者的患者，并进行了一项实验，其中从非常小的石蜡包裹的组织中提取RNA，大约3毫米。

项目成果

トランスサイレチン心アミロイドーシスにおけるアミロイド沈着が左室機能に及ぼす影響

淀粉样蛋白沉积对转甲状腺素蛋白心脏淀粉样变性左心室功能的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: Nakano Tomoya;Onoue Kenji;Seno Ayako;Ishihara Satomi;Nakada Yasuki;Nakagawa Hitoshi;Ueda Tomoya;Nishida Taku;Soeda Tsunenari;Watanabe Makoto;Kawakami Rika;Hatakeyama Kinta;Sakaguchi Yasuhiro;Ohbayashi Chiho;Saito Yoshihiko;中野知哉，尾上健児，寺崎智志，石原里美，寺田智代子，畠山金太，坂口泰弘，斎藤能彦
• 通讯作者: 中野知哉，尾上健児，寺崎智志，石原里美，寺田智代子，畠山金太，坂口泰弘，斎藤能彦

尿毒症性心筋症発症におけるMonocyte Chemoattractant Protein-1を介した非感染性慢性炎症の関与

单核细胞趋化蛋白-1介导的非感染性慢性炎症参与尿毒症心肌病的发生

• 发表时间: 2021
• 作者: 中野知哉;尾上健児;妹尾絢子;石原里美;中田康紀;中川仁;渡邊邊言;畠山 金太;坂口泰弘;大林千穂;斎藤能彦
• 通讯作者: 斎藤能彦

LMNA関連家族性拡張型心筋症に対する抗アンドロゲン療法の治療効果の検討

抗雄激素治疗 LMNA 相关家族性扩张型心肌病的疗效观察

• 发表时间: 2022
• 作者: 中野知哉;尾上健児;中田康紀;橋本行弘;中川仁;上田友哉;妹尾絢子;西田卓;渡邉真言;坂口泰弘;斎藤能彦
• 通讯作者: 斎藤能彦

トランスサイレチン心アミロイドーシスにおける心筋へのアミロイド沈着が左室機能に及ぼす影響

转甲状腺素蛋白心肌淀粉样变性心肌淀粉样蛋白沉积对左心室功能的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: Nakano Tomoya;Onoue Kenji;Seno Ayako;Ishihara Satomi;Nakada Yasuki;Nakagawa Hitoshi;Ueda Tomoya;Nishida Taku;Soeda Tsunenari;Watanabe Makoto;Kawakami Rika;Hatakeyama Kinta;Sakaguchi Yasuhiro;Ohbayashi Chiho;Saito Yoshihiko;中野知哉，尾上健児，寺崎智志，石原里美，寺田智代子，畠山金太，坂口泰弘，斎藤能彦;中野知哉，尾上健児，寺崎智志，石原里美，寺田智代子，畠山金太，坂口泰弘，斎藤能彦
• 通讯作者: 中野知哉，尾上健児，寺崎智志，石原里美，寺田智代子，畠山金太，坂口泰弘，斎藤能彦

Involvement of Chronic Non- infectious Inflammation via Monocyte Chemoattractant Protein-1 in Uremic Cardiomyopathy; A Human Biopsy Study

单核细胞趋化蛋白-1 参与慢性非感染性炎症在尿毒症心肌病中的作用；

• 发表时间: 2021
• 作者: 中野知哉;尾上健児;妹尾絢子;中田康紀;中川仁;畠山金太;坂口泰弘;斎藤能彦
• 通讯作者: 斎藤能彦