血中循環腫瘍細胞を用いた大腸癌遠隔転移を規定する遺伝子群の同定

利用循环肿瘤细胞鉴定调节结直肠癌远处转移的基因

• 批准号: 21K15916
• 负责人: 石橋 嶺
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15916/
• 关键词: 循環腫瘍細胞

オンコパネルを用いた遺伝子解析に基づく薬剤決定に見られるように、癌の診療は癌細胞内の遺伝子変異・発現情報に基づく診療に急速にシフトしつつある。したがって、今後、簡便に、頻回に、癌細胞の遺伝子情報を取得する方法が必須となると考えられる。血中循環腫瘍細胞（circulating tumor cell）の捕捉はその手法のひとつであるが、申請者は数年来、簡便なポリマー樹脂CTCチップを応用し、閉塞性大腸癌に対する内視鏡的金属ステント留置術の前後でのCTC数の変化を中心に検討しつつCTCの確実な捕捉法を樹立してきた。本申請では、CTCの捕捉だけでなく その遺伝子解析研究を進め、大腸癌患者を対象に捕捉したCTCのホットスポットの遺伝子変異の半網羅的解析とRNA発現状況の半網羅的解析を行って、それらと臨床情報とを統合して解析することで真に遠隔転移惹起と相関する遺伝子変異・発現遺伝子セットを同定する。そのうえで、転移ドライバー分子を絞り込み、機能解析を加えて大腸癌遠隔転移責任分子を同定する。本年度は、これまでの論文研究でも使用してきた癌の特異的表面マーカーに対する抗体によるCTC 捕捉原理を応用した簡便なマイクロ流体デバイス「樹脂 CTC チップ」を用いてヒト大腸癌患者の血清からCTCを捕捉する。その後の遺伝子解析を円滑にすすめるために、CTCチップに供する前にCD45磁気ビーズを用いて白血球をあらかじめ除去した。2) 一連の操作で回収されたCTCをもとにRNAシークエンスを行い、臨床病態、特に遠隔転移の出現との関連性を検討する。その結果、血行性転移に関わる可能性の高い遺伝子セット、あるいはLgr5のような単一遺伝子、あるいは遺伝子変異を抽出し検討中である。

正如基于使用 oncopanels 进行基因分析的药物决策中所见，癌症治疗正在迅速转向基于癌细胞内基因突变和表达信息的治疗。因此，人们认为，一种能够轻松且频繁地获取癌细胞遗传信息的方法在未来将是至关重要的。捕获血液中的循环肿瘤细胞就是一种这样的方法，多年来申请人已经将简单的聚合物树脂CTC芯片应用于阻塞性结直肠癌的内窥镜金属支架置入，我们已经建立了一种捕获CTC的可靠方法，重点关注CTC的变化。之前和之后的 CTC 数量。在这个应用中，我们不仅会捕获CTC，还会对其进行基因分析研究，通过整合和分析这些在结直肠癌患者中捕获的CTC的热点，对基因突变和RNA表达状态进行半详尽分析。和临床信息，我们将识别与诱导远处转移真正相关的基因突变和表达基因集。然后，我们将缩小转移驱动分子的范围并进行功能分析，以确定负责结直肠癌远处转移的分子。今年，我们将使用一种简单的微流体装置“树脂 CTC 芯片”从人类结直肠癌患者的血清中捕获 CTC，该装置应用了先前研究中使用的针对癌症特定表面标记物的抗体捕获 CTC 的原理。论文做。为了便于后续的基因分析，在将白细胞应用于 CTC 芯片之前，使用 CD45 磁珠去除白细胞。 2）根据一系列操作收集的CTC进行RNA测序，并检查与临床病理的关系，特别是远处转移的出现。因此，我们目前正在提取和检查可能参与血行转移的基因组、Lgr5等单基因或基因突变。

项目成果

Mutant KRAS drives metabolic reprogramming and autophagic flux in premalignant pancreatic cells.

• DOI: 10.1038/s41417-021-00326-4
• 发表时间: 2022-05
• 期刊: CANCER GENE THERAPY
• 影响因子: 6.4
• 作者: Suzuki, Tatsunori;Kishikawa, Takahiro;Sato, Tatsuyuki;Takeda, Norihiko;Sugiura, Yuki;Seimiya, Takahiro;Sekiba, Kazuma;Ohno, Motoko;Iwata, Takuma;Ishibashi, Rei;Otsuka, Motoyuki;Koike, Kazuhiko
• 通讯作者: Koike, Kazuhiko