The Role of AhR in carcinogenesis from inflammatory bowel disease and its usefulness as a novel tumor marker.

AhR 在炎症性肠病癌变中的作用及其作为新型肿瘤标志物的用途。

基本信息

批准号：
21K15400
负责人：
的場久典
金额：
$ 3万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15400/
关键词：
AhR CAD CAC SATB2 DNAメチル化 GS-II terminal βGlcNAc p53 Ki-67 炎症性腸疾患(IBD)炎症性発癌メチル化腫瘍マーカー

项目摘要

Colitis associated dysplasia(CAD)およびcolitis associated carcinoma(CAC)に対するAryl hydrocarbon receptor(AhR)の免疫染色に関して、強度が不十分なため、より強力なポリマー法の二次抗体による再検討を行ったところ、CAD19例中17例、CAC4例中4例でAhRの発現上昇を認め、陽性率が向上した。再検討によりAhRの発現低下例が少数となり低下例特異的な発生機序の検索が困難なことから、予定していたエクソーム解析を中止した。また、バイサルファイトシークエンス法によりCAD, CACのAhRプロモーター領域のメチル化解析を行ったが、シークエンスの解読が困難で明瞭な結果を得られなかった。QubitによるDNAの再定量では分光光度計による測定値の1/10程度であり、テンプレートDNAの量が不十分と考えられた。今後AhR以外の遺伝子のプロモーター領域のメチル化について検索する可能性を考え、バイサルファイト全ゲノムシークエンスによる網羅的解析を行う方針とした。さらに、Sessile serrated lesions(SSL)およびmicrovesicular hyperplastic polyps(MVHPs)においてterminal βGlcNAcが増加することを示すことができたため(Matoba et al. Pathol Int 2023)、同様の検索をCAD, CACに対しても行う方針とした。terminal α/βGlcNAcに特異的なGS-II レクチン染色では、CAD19例中15例、CAC4例中4例で陽性所見を認めた。terminal αGlcNAcに特異的なHIK1083の陽性所見は認めず、GS-II陽性例にterminal βGlcNAcが存在するものと考えられた。

由于芳基烃受体（AHR）的免疫染色相关性发育不全（CAD）和结肠炎相关癌（CAC）的强度不足，我们使用二级抗体审查了一种更强的聚合物方法。在19例CAD病例中的17例和4例CAC病例中的4例中，观察到AHR表达的增加，导致阳性率提高。重新审查后，少数AHR表达的病例减少，因此很难寻找特定于下降案件的发展机制，因此停止计划的外显子组分析。此外，通过Bisulfite测序方法对CAD和CAC的AHR启动子区域进行了甲基化分析，但是该序列很难解密，并且没有获得清晰的结果。使用QUBIT的DNA要求约为通过分光光度计测量的值的1/10，并且模板DNA的量被认为是不足的。考虑到未来AHR以外的其他基因启动子区域的甲基化的可能性，该计划是使用亚硫酸盐整个基因组测序进行全面的分析。此外，由于有可能表明末端βGLCNAC增加了无链锯齿病变（SSL）和微刺激增生性息肉（MVHPS）（Matoba等人Pathol int 2023），因此对CAD和CAC进行了类似的搜索。末端GS-II凝集素染色特异于α/βGlCNAC在19例CAD病例中的15例和4例CAC病例中有4例显示阳性发现。没有针对末端αGlCNAC的HIK1083的阳性发现，并且认为在GS-II阳性病例中存在末端βGlCNAC。