Stabilization of stalled replication forks by fork-binding proteins

通过叉结合蛋白稳定停滞的复制叉

• 批准号: 23657081
• 负责人: MASAI Hisao
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23657081/
• 关键词: PriAタンパク質; 複製フォーク; 複製ストレス; RecGタンパク質; チェックポイント応答; 染色体脆弱部位; DNA結合タンパク質; 染色体不安定性症候群; 複製複合体; DNA複製停止; ゲノム不安定性

We previously showed that E. coli PriA protein, in collaboration with RecG, specifically binds and can stabilize an arrested replication fork. In this proposal we attempted to stabilize stalled replication forks in eukaryotic cells by utilizing these two proteins. We first developed an antibody against PriA and showed that stalled replication forks can be detected by ChIP-chip analyses. In response to fork arrest treatment, PriA bound to oriC in the wild-type cells, whereas it bound to the terC region under the condition where oriC is not functional. We then expressed PriA in fission yeast cells, examined its binding to chromatin. PriA was enriched near the replication origins. We are now expressing PriA in various mutant cells, and will examine if PriA can stabilize the fork by measuring the length of SSB coated single-strand.

我们之前表明，大肠杆菌 PriA 蛋白与 RecG 合作，特异性结合并稳定停滞的复制叉。在这个提案中，我们试图通过利用这两种蛋白质来稳定真核细胞中停滞的复制叉。我们首先开发了一种针对 PriA 的抗体，并表明可以通过 ChIP 芯片分析检测停滞的复制叉。作为对叉阻滞处理的反应，PriA 在野生型细胞中与 oriC 结合，而在 oriC 不起作用的情况下，它与 terC 区域结合。然后我们在裂殖酵母细胞中表达 PriA，检查其与染色质的结合。 PriA 在复制起点附近富集。我们现在在各种突变细胞中表达 PriA，并将通过测量 SSB 包被的单链的长度来检查 PriA 是否可以稳定叉。

项目成果

Replication timing regulation of eukaryotic replicons: Rif1 as a global regulator of replication timing.

• DOI: 10.1016/j.tig.2013.05.001
• 发表时间: 2013-08
• 期刊: Trends in genetics : TIG
• 作者: S. Yamazaki;Motoshi Hayano;H. Masai

Regulation of replication fork in maintenance of genomic integrity

复制叉在维持基因组完整性中的调节

• 发表时间: 2012
• 作者: Nishimura T;Motoi M;Niri Y;Watanuki S;吉森 保;西村貴孝,本井碧,二里洋輔,星良和,近藤隆一郎,綿貫茂喜;Hisao Masai;鈴木忠;Tamotsu Yoshimori;西村貴孝,本井碧,二里洋輔,星良和,近藤隆一郎,太田博樹,綿貫茂喜;正井久雄;二里洋輔,西村貴孝,本井碧,崔多美,星良和,近藤隆一郎,綿貫茂喜;東條元昭;Hisao Masai
• 通讯作者: Hisao Masai

Dbf4

数据库4

• 发表时间: 2012
• 期刊: The Encyclopedia of Signaling Molecules Springer Reference and Database Publishing
• 作者: Masai;H.
• 通讯作者: H.

レプリコン仮説５０周年

复制子假说诞生 50 周年

• 发表时间: 2013
• 作者: Hisao Masai;Yutaka Kanoh;Satoshi Yamazaki;Motoshi Hayano;Naoko Yoshizawa;Kenji Moriyama;Yumeka Matsushima;Naoko Kakusho;and Rino Fukatsu;正井 久雄
• 通讯作者: 正井 久雄

イントロダクション

介绍

• 发表时间: 2013
• 作者: Goto;H.;正井 久雄
• 通讯作者: 正井 久雄