evelopment of temperature responsible magnetic nanoparticles for targeting cancer cells

开发用于靶向癌细胞的温度响应磁性纳米颗粒

基本信息

  • 批准号:
    23656528
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.5万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 财政年份:
    2011
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2011 至 2012
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

A microparticle surface was designed by the unique method incorporating streptavidin-biotin affinity and sortase A (SrtA)-catalyzed transpeptidation. Leucine-proline-glutamate-threonine-glycine-tagged streptavidin (Stav-LPETG) was immobilized on the surface using streptavidin-biotin affinity, and GGGGG-tagged red fluorescent protein (Gly5-RFP) was conjugated with SrtA. Biotinylated fluorescein isothiocyanate (biotin-FITC) was then bound to residual biotin-binding sites in Stav-LPETG. The resulting particles had RFP and FITC immobilized on the surface via Stav-LPETG, and RFP- and FITC-associated fluorescence was observed using fluorescence microscopy. Finally, GGG-tagged glucose oxidase and biotinylated horseradish peroxidase were immobilized on the microparticle surface, resulting in a functional particle capable of detecting glucose. This particle can be repeatedly used and is more sensitive in detecting glucose than particles prepared using chemical modification. Our method provides a simple strategy for site-specific coimmobilization on molecular surfaces and expands the use of protein hybrid devices.
通过结合链霉亲和素-生物素亲和力和分选酶 A (SrtA) 催化的转肽作用的独特方法设计了微粒表面。使用链霉亲和素-生物素亲和力将亮氨酸-脯氨酸-谷氨酸-苏氨酸-甘氨酸标记的链霉亲和素 (Stav-LPETG) 固定在表面上,并将 GGGGG 标记的红色荧光蛋白 (Gly5-RFP) 与 SrtA 缀合。然后将生物素化异硫氰酸荧光素(生物素-FITC)与 Stav-LPETG 中残留的生物素结合位点结合。所得颗粒通过 Stav-LPETG 将 RFP 和 FITC 固定在表面,并使用荧光显微镜观察 RFP 和 FITC 相关荧光。最后,GGG标记的葡萄糖氧化酶和生物素化的辣根过氧化物酶被固定在微粒表面,形成能够检测葡萄糖的功能颗粒。该颗粒可以重复使用,并且在检测葡萄糖方面比使用化学修饰制备的颗粒更灵敏。我们的方法为分子表面上的位点特异性共固定提供了一种简单的策略,并扩展了蛋白质混合装置的使用。

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Sortase A を用いた酵素配向固定化微粒子の作製
使用 Sortase A 制备酶定向固定化微粒
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Guirimand;G.;Higashikubo;R.;Wakabayashi;T.;Yasumoto;S.;Mizutani;M.;Sugimoto;Y.;Seki;H.;Muranaka;T.;Okazawa;A;間部 悟ら;大橋広行・阿部亮二・高木広明・上田宏;秦 悠斗 ・松本 拓也 ・田中 勉・近藤 昭彦
  • 通讯作者:
    秦 悠斗 ・松本 拓也 ・田中 勉・近藤 昭彦
Streptavidin を用いた部位特異的な異種タンパク質同時固定化技術の開発
使用链霉亲和素开发位点特异性异源蛋白共固定技术
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    松本拓也;田中勉;近藤昭彦
  • 通讯作者:
    近藤昭彦
ストレプトアビジンを介したタンパク質の高配向同時固定化技術の開発
通过链霉亲和素开发蛋白质高度定向共固定技术
  • DOI:
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Guirimand;G.;Higashikubo;R.;Wakabayashi;T.;Yasumoto;S.;Mizutani;M.;Sugimoto;Y.;Seki;H.;Muranaka;T.;Okazawa;A;中林 秀人ら;松本 拓也・秦 悠斗・田中 勉・近藤 昭彦
  • 通讯作者:
    松本 拓也・秦 悠斗・田中 勉・近藤 昭彦
Sortase A-catalyzed design of multi-labeled macromolecular via recombinant streptavidin
分选酶 A 催化重组链霉亲和素设计多标记大分子
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Matsumoto T;Tanaka T;Kondo A.
  • 通讯作者:
    Kondo A.
Site-specific streptavidin-protein labeling application using sortase A
使用分选酶 A 进行位点特异性链霉亲和素蛋白标记应用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Matsumoto T;Tanaka T;Kondo A.
  • 通讯作者:
    Kondo A.
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  • 影响因子:
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  • 作者:
    SHINOHARA Ryohei;SASAKI Kengo;INOUE Jun;HOSHI Namiko;FUKUDA Itsuko;SASAKI Daisuke;KONDO Akihiko;OSAWA Ro
  • 通讯作者:
    OSAWA Ro

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