Detection of cancer specific T cells on a chip

芯片上癌症特异性 T 细胞的检测

基本信息

批准号：
24650630
负责人：
KISHI HIROYUKI
金额：
$ 2.5万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

Cancer-specific cytotoxic T lymphocytes play important roles in cancer immunity. Previously we developed microwell-array chips that have an array of about 250,000 microwells in which only single lymphocytes can be accommodated. In this study, we showed that we could detect antigen-specific T lymphocytes by culturing single lymphocytes in each microwell, stimulating them with antigenic peptides, and detecting their cytokine-secretion on the chip. By retrieving the detected single T lymphocytes, we could amplify TCRalpha/beta cDNAs, insert them in a retrovirus vector with homologous recombination, and examine their antigen-specificity by expressing them on a TCR-deficient T cell line. The whole process can be accomplished within 10 days. The system may greatly contribute to the cancer immunotherapy in the future.

癌症特异性细胞毒性T淋巴细胞在癌症免疫中发挥重要作用。此前我们开发了微孔阵列芯片，该芯片具有约250,000个微孔的阵列，其中只能容纳单个淋巴细胞。在这项研究中，我们表明，通过在每个微孔中培养单个淋巴细胞，用抗原肽刺激它们，并在芯片上检测它们的细胞因子分泌，我们可以检测抗原特异性T淋巴细胞。通过检索检测到的单个 T 淋巴细胞，我们可以扩增 TCRα/β cDNA，将它们插入同源重组的逆转录病毒载体中，并通过在 TCR 缺陷 T 细胞系上表达它们来检查它们的抗原特异性。整个过程可以在10天内完成。该系统可能会对未来的癌症免疫治疗做出巨大贡献。

项目成果

期刊论文数量（40）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Cloning of human antigen-specific TCRs can confer the candidates for cancer gene therapy.

克隆人类抗原特异性 TCR 可以为癌症基因治疗提供候选者。

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kobayashi E;Mizukoshi E;Kishi H;Hamana H;Nagai T;Ozawa T;Nakagawa H;Jin A;Kaneko S;Muraguchi A
通讯作者：
Muraguchi A

Comparison of TCR repertoires in EBV-specific T cells detected by three different staining methods．

三种不同染色方法检测到的 EBV 特异性 T 细胞中 TCR 库的比较。

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
齊藤　亮平;木山　正啓;岩野　智;北田　昇雄;伊藤　和人;軽部　一磨;平野　誉;丹羽　治樹;牧　昌次郎;浜名　洋　他
通讯作者：
浜名　洋　他

T細胞受容体のクローニング方法

如何克隆 T 细胞受体

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

がんのTCR遺伝子治療にむけた候補TCR遺伝子の迅速クローニング法

用于癌症TCR基因治疗的候选TCR基因的快速克隆方法

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yoshikawa,K.;Matsumoto;Y.;Ito;J.;Shiojiri Y.;Reinherz E.;To M.;岸裕幸,小林栄治,水腰英四郎,小澤龍彦,金子周一,村口篤
通讯作者：
岸裕幸,小林栄治,水腰英四郎,小澤龍彦,金子周一,村口篤

Detection of antigen-stimulated cytokine-secretion in human T-cells at single cell levels on a live cell chip

在活细胞芯片上以单细胞水平检测人类 T 细胞中抗原刺激的细胞因子分泌