細胞内寄生菌感染症の治療に向けた細胞接着能を有する銀ナノ粒子の開発

具有细胞粘附能力的银纳米粒子的开发用于治疗细胞内寄生真菌感染

• 批准号: 22KJ2520
• 负责人: 原田 彩花
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2520/
• 关键词: 細菌産生毒素; 細胞接着性タンパク質; 銀ナノプレート; 抗菌活性; 細胞内寄生菌; サルモネラ菌; 感染症

令和４年度は、腸管出血性大腸菌O113株が産生するタンパク質毒素(SubAB)のBサブユニット(SubB)の細胞接着性に着目し、高く広い抗菌スペクトルを持つ銀ナノプレート(AgNPLs)に修飾することで細胞内寄生菌に対する抗菌材としての応用を試みた。AgNPLsは湿式還元法にて作製した。Agとチオールが吸着しやすいことを利用して、チオールとカルボキシル基を末端に持つポリエチレングリコール（SH-PEG-COOH）を修飾（PEG-AgNPLs）した。AgNPLs表面のカルボキシル基をニトリロ三酢酸誘導体とニッケルの配位錯体にて化学修飾し、さらにHis-tag介してSubBを結合させた。SubBを修飾したAgNPLs（SubB-AgNPLs）はPEG-AgPLsよりも分散安定性・抗菌性・細胞内取り込みを増強することが確認された。PEG-AgNPLsは細胞内に寄生したサルモネラ菌に対する抗菌性はほとんど示さなかったが、SubB-AgNPLsはサルモネラ菌の生存率を83％減少させた。さらに、興味深いことにサルモネラ菌が感染している細胞のほうが非感染細胞よりもSubB-AgNPLsをより多く取り込むことがわかった。

在2022年，我们专注于由肠ha剂量大肠杆菌O113菌株产生的蛋白毒素（Subab）的B亚基（Subb）的细胞粘附，并试图将其应用于具有较高的抗细菌抗体物质的较高的抗细菌型物质，并将其应用于银纳米板（AGNPL）（AGNPLS）。通过湿还原法制备AGNPL。利用这一事实，即Ag和硫醇很容易吸附，将聚乙烯乙二醇（SH-PEG-COOH）与终端处的硫醇和羧基一起被修饰（PEG-AGNPLS）。 Agnpls表面上的羧基通过硝基三环酸衍生物和镍的配位复合物进行化学修饰，Subb通过HIS-TAG进一步结合。与PEG-AGPLS相比，确认子B修饰的AGNPLS（Subb-agnpls）可以增强分散稳定性，抗菌特性和细胞内摄取。尽管PEG-AGNPLs对细胞内寄生的沙门氏菌的抗菌特性很少，但Subb-agnpls将沙门氏菌的存活率降低了83％。此外，有趣的是，与未感染的细胞相比，感染沙门氏菌的细胞吸收了更多的子AGNPL。

项目成果

細胞内寄生菌感染症治療に向けた細胞接着性銀ナノ粒子の開発

开发细胞粘附银纳米颗粒用于治疗细胞内寄生真菌感染

• 发表时间: 2022
• 作者: ◯原田 彩花;上野 太輝;甲斐 雄大;徐 薇;津々木 博康;小野 勝彦;八尋 錦之助;澤 智裕;新留 琢郎
• 通讯作者: 新留 琢郎