皮膚レジデントメモリーT細胞の発現分子が乾癬病態形成に及ぼす影響の検討

皮肤常驻记忆T细胞表达的分子对银屑病发病机制影响的研究

• 批准号: 22KJ2071
• 负责人: 久米 美輝
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2071/
• 关键词: 皮膚レジデントメモリーT細胞; 尋常性乾癬; ケラチノサイト; セマフォリン4A; SEMA4A

申請者は、T17の免疫応答を制御するSEMA4Aの発現が、ヒト表皮において、健常人と比較し乾癬の病変部・非病変部で低下していることを免疫染色で確認した。そこで、SEMA4Aを欠損したマウス（SEMA4A欠損マウス）と野生型マウスにおいて、マウス乾癬様皮疹誘発モデルを使用し、乾癬の病態形成とSEMA4Aの関わりの検討を開始した。SEMA4A欠損マウスに応答性が微細な条件の相違によって異なることが分かってきた。さらに、疾患モデルを生じる前のnaiveな状態において、SEMA4A欠損マウスでは既に表皮肥厚傾向がみられることが病理組織像から判明した。さらに、免疫染色の結果からも真皮内T細胞浸潤数が増えていることを確認した。フローサイトメトリーの結果からは皮膚内のレジデントメモリーT細胞(TRM)の割合が増加していること、表皮ではT細胞におけるVγ2+T細胞、Vγ2-Vγ3-TCRγδ+T細胞の割合がSEMA4A欠損マウスで増加していること、それぞれの分画内でのIL17A産生細胞がSEMA4A欠損マウスで増加していることが判明した。さらに、qRT-PCRの結果から、SEMA4A欠損マウスの表皮でCCL20、TNFα、IL22が上昇していることを確認した。また、マウス単離ケラチノサイトのqPCR結果から、マウスケラチノサイトのSEMA4A発現強度が分化度に依存しないことを確認した。ケラチノサイトのSEMA4Aの発現の有無、強度が、表皮肥厚、皮膚内細胞浸潤、特にTRM構築に寄与している可能性、さらに、TRMの機能に寄与している可能性について、今後ヒト検体やマウスモデルを通して検討を進める予定である。また、尋常性乾癬や円形脱毛症、皮膚リンパ腫といったヒトの様々な疾患でも皮膚TRMの評価をflow cytometry や組織染色などで行い、データを蓄積して疾患ごとの特性を見出す所存である。

申请人通过免疫染色证实，与健康个体相比，控制T17免疫反应的SEMA4A的表达在人类表皮的银屑病皮损和非皮损中降低。因此，我们开始在缺乏SEMA4A的小鼠（SEMA4A缺陷小鼠）和野生型小鼠中使用小鼠银屑病样皮疹诱导模型来研究SEMA4A与银屑病发病机制之间的关系。研究发现，SEMA4A 缺陷小鼠的反应能力因条件的细微差异而异。此外，组织病理学图像显示，SEMA4A 缺陷小鼠在建立疾病模型之前，在幼稚状态下已经表现出棘皮症的倾向。此外，免疫染色结果证实真皮中T细胞浸润数量增加。流式细胞术结果显示，皮肤中常驻记忆T细胞（TRM）的百分比增加，且表皮中Vγ2+ T细胞和Vγ2-Vγ3-TCRγδ+ T细胞的百分比高于SEMA4A缺陷小鼠结果发现，SEMA4A 缺陷小鼠中，每个部分中产生 IL17A 的细胞均有所增加。此外，qRT-PCR 结果证实，SEMA4A 缺陷小鼠表皮中的 CCL20、TNFα 和 IL22 升高。此外，从分离的小鼠角质形成细胞的qPCR结果中，我们证实小鼠角质形成细胞中SEMA4A表达的强度不依赖于分化程度。今后，我们将研究角质形成细胞中SEMA4A表达的有无和强度是否有助于黑棘皮症、皮内细胞浸润、特别是TRM构建，以及它是否有助于TRM功能。继续研究。此外，我们将利用流式细胞术和组织染色来评估斑块状银屑病、斑秃和皮肤淋巴瘤等各种人类疾病中的皮肤TRM，并积累数据以发现每种疾病的特征。

项目成果

The inhibitory role of ganglioside GD3 on the functional activities of benign T cells in cutaneous T-cell lymphoma

神经节苷脂GD3对皮肤T细胞淋巴瘤良性T细胞功能活性的抑制作用

• 发表时间: 2021
• 作者: Kume Miki;Eiji Kiyohara;Rei Watanabe;Manabu Fujimoto
• 通讯作者: Manabu Fujimoto