犬移行上皮癌の発がん・進展全機構の解明と新規治療法の開発

阐明犬移行细胞癌发生和进展的整个机制并开发新的治疗方法

• 批准号: 17J06806
• 负责人: 吉竹 涼平
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17J06806/
• 关键词: BRAF遺伝子変異; 犬移行上皮癌; COX2; プロスタグランジン; MAPK経路; ドライバー変異; 薬剤抵抗性

本年度も前年度に引き続き、犬移行上皮癌(cTCC)におけるBRAF遺伝子変異の意義を①細胞の生存・増殖と②COX2/PGE2の過剰産生を介した炎症環境の構築という2つの観点から研究を実施した。①に関しては、前年度にcTCCはBRAF阻害剤に対し初期耐性を示すことが示唆されたため、本年度はその獲得メカニズムの探索を行った。化合物ライブラリを用いた検討により、10種の薬剤でBRAF阻害剤との併用により相乗的な細胞生存率の低下を認めた。またそのうちの多くは、BRAFの属するMAPK経路の上流に位置する特定の分子を標的とする薬剤であった。よって、cTCCにおけるBRAF阻害剤に対する初期耐性の獲得には、今回明らかとなった分子を介したMAPK経路の再活性化やバイパス経路の活性化が重要であることが示唆された。②に関しては、前年度の結果をより一般化するために、BRAF変異保有cTCC細胞株6株を用いて同様の評価を行った結果、COX2/PGE2を過剰発現していなかった細胞株を除いた5株において、COX2/PGE2発現が同様に抑制された。以上のことから、BRAF遺伝子変異によるMAPK経路の活性化はcTCCにおけるCOX2/PGE2の過剰発現に重要であることが示唆された。また、前年度の結果からcTCCにおけるCOX2/PGE2発現への関連が示唆されたp38/JNK経路についても、in vitroでの検討を行った。結果として、p38/JNKの阻害剤はそれぞれcTCC細胞株のPGE2産生を抑制したが、p38阻害剤はCOX2発現も抑制する一方で、JNK阻害剤はCOX2発現を亢進することが明らかになった。またMAPK経路の活性化には影響しなかったことから、p38/JNK経路はBRAF変異によるMAPK経路の活性化とは異なるメカニズムによりCOX2/PGE2発現を制御していることが示唆された。

与上一年一样，我们从两个角度进行了研究BRAF基因突变在狗过渡细胞癌（CTCC）中的重要性：1）细胞存活和增殖以及2）通过过量生产COX2/PGE2来构建炎症环境。关于①，建议CTCC在上一年对BRAF抑制剂表现出最初的抵抗力，因此今年我们研究了采集机制。当将10种药物与BRAF抑制剂结合使用时，观察到细胞活力的协同降低。其中许多是靶向位于BRAF属于的MAPK途径上游的特定分子的药物。因此，已经提出，已揭示的分子介导的MAPK途径和旁路途径的重新激活对于获得CTCC中BRAF抑制剂的早期耐药性很重要。关于2，为了使上一年的结果更加普遍，我们使用六个带有BRAF突变的CTCC细胞系进行了类似的评估，并发现Cox2/PGE2表达在五个菌株中类似地抑制，不包括没有过表达Cox2/pge2的细胞系。以上表明，BRAF基因突变激活MAPK途径对于CTCC中COX2/PGE2的过表达很重要。此外，还研究了从上一年的结果中与CTCC中COX2/PGE2在CTCC中的表达有关系的p38/JNK途径。结果，据表明，尽管p38/JNK的抑制剂抑制了CTCC细胞系中的PGE2产生，但p38抑制剂也抑制了COX2的表达，而JNK抑制剂增强了COX2的表达。此外，它不受MAPK途径激活的影响，这表明p38/JNK途径通过与BRAF突变激活MAPK途径不同的机制来调节COX2/PGE2的表达。

项目成果

ERK/MAPK経路は犬尿路上皮癌におけるCOX2/PGE2 Axisを活性化する

ERK/MAPK 通路激活犬尿路上皮癌中的 COX2/PGE2 轴

• 发表时间: 2018
• 作者: 吉竹 涼平;衛藤 翔太郎;品田 真央;佐伯 亘平;中野 令;杉谷 博士;西村 亮平;中川 貴之
• 通讯作者: 中川 貴之

薬剤スクリーニングによるBRAFV595E変異犬尿路上皮癌のプロスタグランジンE2産生メカニズムと細胞増殖への意義の探索

通过药物筛选探讨BRAFV595E突变犬尿路上皮癌前列腺素E2产生机制及其对细胞增殖的意义

• 发表时间: 2018
• 作者: 吉竹 涼平;佐伯 亘平;衛藤 翔太郎;西村 亮平;中川 貴之
• 通讯作者: 中川 貴之

BRAF(V595E)変異犬尿路上皮癌におけるプロスタグランジンE2産生と細胞増殖を標的とした薬剤スクリーニング

针对 BRAF(V595E) 突变犬尿路上皮癌前列腺素 E2 产生和细胞增殖的药物筛选

• 发表时间: 2018
• 作者: 吉竹 涼平;衛藤 翔太郎;佐伯 亘平;田中 由依子;加藤 大貴;吉本 翔;西村 亮平;中川 貴之
• 通讯作者: 中川 貴之