歯肉上皮組織自然免疫システムの調節により歯周病原細菌の結合組織侵入を阻止できるか

能否通过调节牙龈上皮组织的先天免疫系统来预防牙周病原菌对结缔组织的侵袭？

基本信息

批准号：
18K09615
负责人：
金子高士
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Fukuoka Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

歯周炎歯周組織において一部の歯周病原細菌が歯肉上皮組織や、さらに深部の結合組織内に侵入していることが報告されている。しかしながら角化層、顆粒層、有棘層、基底層、基底膜から構成される重層上皮において、どのような経路で細菌が侵入しているか明らかではない。非定型NLRP3インフラマソーム活性化に伴うピロトーシスと呼ばれる細胞死が種々の病原細菌の感染と関連していることが示されている。そこで我々はHSC-2単層培養におけるカスパーゼ4、5刺激による非定型NLRP3インフラマソーム活性化による上皮細胞細胞死に関する研究を行った。Esherichia coli LPSのHSC-2細胞へのトランスフェクションは、細胞死を誘導するのに対して、Porphyromonas gingilvalis LPSのトランスフェクションは細胞死を誘導しないことを見出した。さらにマクロファージのTHP-1細胞を用い実験を行った。THP-1細胞においてはエレクトロポレーション法を用いてLPSの細胞質内に配送した。THP-1細胞においては P. gingivalis LPSは細胞死を誘導したが、その活性はE. coli LPSよりも弱かった。THP-1細胞をRT-PCRで解析したところ、カスパーゼ4の発現は認められたが、カスパーゼ5の発現は認められなかったこと、さらに両LPSによるピロトーシスはカスパーゼ4インヒビターで抑制されたことから、THP-1においてはカスパーゼ4が非定型型NLRP3の活性化に関与していると思われた。しかしながら、THP-1細胞をtype I IFNやIFNγで処理するとカスパーゼ５のmRNAのupregulationが観察されたことから歯周炎歯肉においてはカスパーゼ５もなんらかの役割を負っている可能性が推測された。

牙周炎据报道，一些牙周病原菌侵入牙龈上皮组织和牙周组织中更深的结缔组织。然而，尚不清楚细菌通过什么途径侵入复层上皮，复层上皮由角质层、颗粒层、棘层、基底层和基底膜组成。与非典型 NLRP3 炎性体激活相关的称为细胞焦亡的细胞死亡已被证明与各种病原菌的感染有关。因此，我们对 HSC-2 单层培养物中 caspase 4 和 5 刺激诱导的非典型 NLRP3 炎性体激活引起的上皮细胞死亡进行了研究。我们发现将大肠杆菌LPS转染到HSC-2细胞中会诱导细胞死亡，而转染牙龈卟啉单胞菌LPS不会诱导细胞死亡。此外，我们使用巨噬细胞THP-1细胞进行了实验。在 THP-1 细胞中，使用电穿孔将 LPS 递送到细胞质中。 P.gingivalis LPS可诱导THP-1细胞死亡，但其活性弱于大肠杆菌LPS。当通过 RT-PCR 分析 THP-1 细胞时，观察到 caspase 4 的表达，但未观察到 caspase 5 的表达，并且两种 LPS 诱导的细胞焦亡均被 caspase 4 抑制剂抑制。在 THP-1 中，caspase-4 似乎参与了其中。非典型 NLRP3 的激活。然而，当 THP-1 细胞用 I 型 IFN 或 IFNγ 处理时，观察到 caspase-5 mRNA 上调，表明 caspase-5 也可能在牙周炎牙龈中发挥作用。

项目成果

期刊论文数量（24）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Crystalline structure of pulverized dental calculus induces cell death in oral epithelial cells

粉碎牙石的晶体结构诱导口腔上皮细胞细胞死亡

DOI：
10.1111/jre.12520
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
3.5
作者：
Ziauddin S M;Yoshimura A;Montenegro Raudales J L;Ozaki Y;Higuchi K;Ukai T;Kaneko T;Miyazaki T;Latz E;Hara Y
通讯作者：
Hara Y

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