Assessing molecular mechanisms of enhancement of memory retention using rats carrying conditional alleles.

使用携带条件等位基因的大鼠评估增强记忆保留的分子机制。

基本信息

批准号：
18KK0458
负责人：
阿部学
金额：
$ 9.98万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019 至 2023
项目状态：
已结题

项目摘要

コンディショナル遺伝子発現制御法（生体内における遺伝子発現時間、発現量、発現細胞種などに任意の制限を加える方法）は遺伝子機能の解析技術として極めて強力であるが、内在遺伝子に対しての点変異や低分子タグのノックインなど微細な変異への適用が困難であることや、変異動物作製のため長い実験期間を要することが問題であった。研究代表者は基課題において、Cre/loxP組換え系を用いた新規コンディショナル遺伝子発現制御法とゲノム編集技術と組み合わせることで、従来の点変異/低分子タグ等のノックイン法が内包する問題点を克服できる可能性を見出し、その検証のため、遺伝子改変マウスを用いた小脳発達の分子機構の解明を目的とした研究を行った。基課題の研究を発展させ、遺伝子改変ラットを用いた青班核ノルアドレナリンニューロンからのドーパミンシグナル伝達機構及び新奇体験による記憶保持の強化の分子機構の解明を目的とする国際共同研究をデンマークAarhus大学DANDRITE研究所の竹内倫徳博士と共に計画した。基課題にて開発されたコンディショナル低分子タグ発現カセットを用いたドーパミン受容体、ドーパミン生合成酵素等を標的としたノックインラットを作製して標的タンパクの発現、動態解析と行動試験を行う。個別目標としては（１）青班核軸索と海馬神経細胞における神経伝達物質とその受容体の関係性の解析（２）青班核ニューロンからのドーパミン放出の分子機序の解析（３）記憶保持の強化過程における海馬ドーパミン受容体の機能解析を設定した。また、記憶保持の強化過程の解析に有用なcFos-tTAノックインラット系統、tTAの動作検証のためのtetO-H2B tdTomatoノックインラット、記憶保持と遺伝子発現の関係を明らかにするためのコンディショナルRpl22-HAノックインラットの作製と解析も行う。

条件基因表达控制定律（一种添加对基因表达时间，表达量，表达细胞种类等任何限制的方法）非常强大，作为一种遗传功能的分析技术，但与内部有所不同基因。问题是，很难应用于细分标签的敲击，并且生产突变动物需要长时间的实验期。研究代表是一个问题，其中敲击方法（例如常规点转换/低分子标签）通过常规敲门方法（例如常规点变量/低分子标签）结合在一起，与新的条件基因结合使用重组系统使用CRE/LOXP重组系统的表达控制方法。丹麦Aarhus University Dandrite，丹麦Aarhus University Dandrite，该大学对基本问题进行了研究，并使用遗传改性大鼠和分子机制从蓝色组去甲肾上腺素神经元中开发了多巴胺信号传递机制，以通过新经验来增强记忆力。研究所的Rinoku Takeuchi。用于使用条件的低分子TAG表达盒在基本任务中开发的有条件的低分子TAG表达盒，以创建目标蛋白，动态分析和动作测试，将用于多巴胺受体，多巴胺活体合成酶等针对的敲门型 - 鼠。作为个体目标，（1）对蓝色组核轴和海马神经细胞中神经递质与受体之间的关系的分析（2）从蓝色组核神经元（3）记忆中释放多巴胺的分析在维持的增强过程中，海马多巴胺受体在维持过程中。此外，CFOS-TTA敲除型系统，可用于分析记忆保留的增强过程，TETO-H2B TETO-H2B TDTOMATO敲击大鼠用于TTA操作验证，有条件的RPL22-我们还制作和分析HA敲击-in敲击-in -in-rats 。

项目成果

期刊论文数量（19）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A discrete neuronal circuit induces a hibernation-like state in rodents

DOI：
10.1038/s41586-020-2163-6
发表时间：
2020-07-02
期刊：
NATURE
影响因子：
64.8
作者：
Takahashi, Tohru M.;Sunagawa, Genshiro A.;Sakurai, Takeshi
通讯作者：
Sakurai, Takeshi

大脳基底核間接路のD2受容体発現細胞におけるNMDA受容体のマグネシウムブロックの減少により誘導される運動制御と学習記憶の変化の解析

基底神经节通路 D2 受体表达细胞中 NMDA 受体镁阻断减少引起的运动控制和学习记忆变化的分析

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
笹岡俊邦;齊藤奈英;知見聡美;阿部学;川村名子;鍋島陽一;田井中一貴;﨑村建司;南部篤
通讯作者：
南部篤

Global knockdown of glutamate decarboxylase 67 elicits emotional abnormality in mice.

DOI：
10.1186/s13041-020-00713-2
发表时间：
2021-01-07
期刊：
Molecular brain
影响因子：
3.6
作者：
Miyata S;Kakizaki T;Fujihara K;Obinata H;Hirano T;Nakai J;Tanaka M;Itohara S;Watanabe M;Tanaka KF;Abe M;Sakimura K;Yanagawa Y
通讯作者：
Yanagawa Y

Generation of Lungs by Blastocyst Complementation in Apneumic Fgf10-Deficient Mice