消化器癌に対する遺伝子改変T細胞と多機能ヘルパーT細胞誘導ワクチン併用療法の開発

转基因T细胞与多功能辅助性T细胞诱导疫苗联合治疗胃肠道癌症的开发

• 批准号: 18K16320
• 负责人: 米田 晃
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K16320/
• 关键词: 免疫療法; ワクチン; 多機能CD4陽性細胞; 免疫治療; 腫瘍免疫

近交系マウスを用いたT細胞輸注療法と多機能CD4陽性細胞誘導ワクチン併用療法の効果の検証とメカニズムの解析〈in vivo評価系〉BALB/cマウス由来肉腫CMS5のネオアンチゲンであるMAPキナーゼERK2の遺伝子変異由来抗原を同定し、その抗原を認識するTCRをクローニングしてTCR Tgマウス (DUC18マウス）を作成し、抗原特異的T細胞の輸注療法モデルを確立している。TCR遺伝子をレトロウイルスベクターで遺伝子導入したマウスリンパ球の輸注療法 のモデル系も確立した。このマウスモデルをT細胞輸注療法と多機能CD4陽性細胞誘導ワクチン併用療法のin vivo評価系とした。〈多機能CD4陽性T細胞誘導ワクチンの作成〉 腫瘍細胞の免疫原性を向上させたものを不活化してwhole cell vaccineとしたものを多機能CD4陽性T細胞誘導ワクチンとした。ワクチンに腫瘍細胞を使用することで腫瘍に含まれる全ての抗原をtargetにすることができる。マウス腫瘍細胞にMHC class II transactivator であるCIITA及び共刺激分子を導入し、免疫原性を向上させたワクチンのプロトタイプを開発した。上記の近交系マウスのT細胞輸注モデルをin vivo評価系とするためBALB/cマウス由来肉腫CMS5におけるワクチンを作成した。

使用近交系小鼠验证T细胞输注疗法和多功能CD4阳性细胞诱导疫苗联合疗法的效果和机制分析（体内评估系统）我们鉴定了源自基因突变的抗原，克隆了识别该抗原的TCR，创建了TCR Tg小鼠（DUC18小鼠），建立了抗原特异性T细胞输注治疗模型。我们还建立了使用小鼠淋巴细胞进行输注治疗的模型系统，其中使用逆转录病毒载体将TCR基因引入其中。该小鼠模型被用作T细胞输注疗法和多功能CD4阳性细胞诱导疫苗联合疗法的体内评估系统。 <多功能CD4阳性T细胞诱导疫苗的制作> 通过灭活提高了免疫原性的肿瘤细胞并制作全细胞疫苗，制作了多功能CD4阳性T细胞诱导疫苗。通过在疫苗中使用肿瘤细胞，可以靶向肿瘤中包含的所有抗原。我们通过将 CIITA（一种 MHC II 类反式激活因子）和共刺激分子引入小鼠肿瘤细胞中，开发了一种具有改进免疫原性的原型疫苗。为了使用上述近交小鼠T细胞输注模型作为体内评估系统，我们创建了针对BALB/c小鼠源性肉瘤CMS5的疫苗。