Investigation of mechanisms of immunosuppression by regulatory dendritic cell-derived exosomes

调节性树突状细胞来源的外泌体免疫抑制机制的研究

• 批准号: 18K16271
• 负责人: 西尾 佳明
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: National Center for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K16271/
• 关键词: 制御性樹状細胞; エクソソーム; 移植片対宿主病; 免疫抑制

本研究課題は移植片対宿主病(Graft versus Host Disease: GvHD)における制御性樹状細胞由来エクソソーム(regulatory dendritic cellderived exosome: rDCexo)の免疫抑制能を検討することを目的とした。前年度、C57BL/6(B6)マウス由来T細胞をB6♀×DBA2♂(B6D2F1:BDF1)へ移植するGvHDモデルを想定していることからin vitroにおいてB6マウス由来T細胞とBDF1マウス由来樹状細胞を用いたリンパ球混合反応試験(Mixed Lymphocyto Reaction: MLR)を用いてBDF1由来制御性樹状細胞(rDC)の免疫抑制能を検討した。しかし、BDF1マウス 由来骨髄細胞から分化誘導したrDCはB6マウス由来T細胞を用いたMLRにおいてBDF1マウス由来骨髄細胞から分化誘導した通常の樹状細胞(conventional DC: cDC) によるB6マウス由来T細胞の増殖を抑制しなかった。 そのため、当該年度においてはB6由来rDCexoを用いてB6→BDF1のマウスGvHDモデルにおけるrDCexoの免疫抑制能を検討することとした。 B6由来骨髄細胞から分化誘導したrDCにはMLRにおいてT細胞増殖抑制能が認められ、rDC培養上清からはrDCexoが回収された。更に、回収されたrDCexoを用いたMLRによるT細胞の増殖抑制試験ではT細胞の増殖が抑制傾向にあり、同T細胞のmRNA発現解析ではGvHD誘導の主要因とされる細胞傷害性顆粒であるPerforinおよびGranzyme Bの発現、T細胞増殖因子であるIL-2、炎症促進性サイトカインであるTNFαの発現が低下しており、rDCexoによるT細胞による細胞傷害抑制およびT細胞増殖抑制、炎症抑制能が示唆された。

该研究项目的目的是研究调节性树突状细胞衍生的外泌体（rDCexo）在移植物抗宿主病（GvHD）中的免疫抑制能力。去年，我们假定了将C57BL/6（B6）小鼠来源的T细胞移植到B6♀×DBA2♂（B6D2F1：BDF1）中的GvHD模型，因此我们开发了B6小鼠来源的T细胞和BDF1小鼠-体外衍生的树突状细胞。我们使用 MLR 研究了 BDF1 衍生的调节性树突状细胞 (rDC) 的免疫抑制能力。然而，诱导分化自 BDF1 小鼠骨髓细胞的 rDC 可以通过使用 B6 小鼠来源 T 细胞在 MLR 中与 BDF1 小鼠来源骨髓细胞分化的常规树突状细胞 (cDC) 与 B6 小鼠来源 T 细胞分化。不抑制增殖。 因此，今年，我们决定使用B6衍生的rDCexo来检测rDCexo在B6→BDF1小鼠GvHD模型中的免疫抑制能力。发现从B6来源的骨髓细胞分化的rDC具有抑制MLR中T细胞增殖的能力，并且从rDC培养上清液中回收了rDCexo。此外，使用回收的rDCexo进行MLR的T细胞增殖抑制试验显示，T细胞增殖趋于受到抑制，并且相同T细胞的mRNA表达分析表明，细胞毒性颗粒被认为是诱导GvHD的主要因素，穿孔素和颗粒酶B、T 细胞生长因子 IL-2 和促炎细胞因子 TNFα 的表达降低，表明 rDCexo 具有抑制 T 细胞毒性、T 细胞增殖和炎症的能力。