動物モデルを用いた気管支敗血症菌感染による病態発生機序の解析

利用动物模型分析支气管败血杆菌感染的发病机制

基本信息

  • 批准号:
    18K15146
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2018
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2018-04-01 至 2019-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ボルデテラ属に分類される代表的な病原因子である百日咳菌、パラ百日咳菌および気管支敗血症菌は、いずれも哺乳動物の呼吸器に感染して特徴的な咳嗽発作(咳発作)を引き起こすが、その発症機構は全く明らかになっていない。そこで本研究では、宿主特異性の広い気管支敗血症菌のラットへの感染系を用い、咳原因因子の同定および発症機構の解明を目指した。前年度までにラットを用いて咳発作を解析し、気管支敗血症菌の咳原因因子は抗シグマ因子をコードするbspRの下流で転写制御を受けて発現することを明らかにしている。また、気管支敗血症菌のBvg+相(病原性)の菌体破砕液をラットに投与すると咳発作が起こるのに対し、Bvg-相(非病原性)菌体破砕液投与では咳発作は起こらない。以上の知見から、Bvg+相で発現し、かつBvg-相でほとんど発現せず、またBspRによって発現レベルに影響を受ける因子を咳原因因子の候補として探索を試みた。BspR欠損株菌体破砕液の投与量を変更し咳発作を解析したところ、野生株と同様の咳発作の推移を示した。このことから咳因子は感染時のみBspRの制御を受けることが示唆された。そこで、野生株とbspR欠損株を比較したRNA-seqと、Bvg+相とBvg-相を比較したマイクロアレイを組み合わせて解析し、Bvg+相で発現し、かつBvg-相でほとんど発現せず、またBspRによって発現レベルに影響を受ける81の候補遺伝子を選出した。更に候補遺伝子を絞り込むため、ラット気管感染時における野生株およびbspR欠損株についてin vivo RNA-seqに供することを目指した。現在RNAサンプルの抽出方法について検討中である。今後は野生株およびbspR欠損株についてin vivo RNA-seqを行うこと、また分画した菌体破砕液を用いた咳原因因子の探索を行う予定である。
代表性致病因子分类为bordetella属,par骨b。 bronchosis B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B. bronchial stimulation B.支气管刺激B.支气管刺激B.支气管刺激B.支气管刺激B.支气管刺激b。 B.支气管刺激B.支气管刺激B.支气管刺激B.支气管刺激B因此,在这项研究中,我们使用了一种感染具有广泛宿主特异性宿主特异性细菌支气管蛋白酶的大鼠的系统,旨在鉴定止咳因子并阐明止咳因子并阐明发作机制。直到上一年,使用大鼠分析了咳嗽的攻击,揭示了在BSPR下游的转录控制下表达支气管肠细菌的咳嗽致病因素,该因素编码了抗sigma因子。此外,当对大鼠的BVG相(非对疗法)细胞破坏溶液的BVG+(致病性)细胞(致病性)施用BVG+(致病性)时,会发生咳嗽攻击,而在给予BVG - 相(非对比度)细胞破坏疗法时,咳嗽攻击并未发生。基于上述发现,我们试图搜索在BVG+相中表达的因素,几乎不在BVG期间表达,并且受BSPR的表达水平影响,作为候选咳嗽病因。当更改BSPR缺乏菌株的细胞破坏溶液的剂量并分析咳嗽攻击时,结果显示出与野生菌株相似的咳嗽攻击进展。这表明只有在感染时才由BSPR控制咳嗽因子。因此,比较了比较BVG+和BVG浓度的微阵列的野生和BSPR缺陷菌株的RNA-Seq,并分析了81个在BVG+相中表达的候选基因,并且在BVG期间很难表达,并且也受到BSPR的影响。此外,为了缩小候选基因的缩小,我们旨在为大鼠气管感染期间的野生和BSPR缺陷菌株提供体内RNA-Seq。当前,正在研究提取RNA样品的方法。将来,我们计划在野生和BSPR缺陷菌株上执行体内RNA-Seq,并使用分馏细胞中断来搜索引起咳嗽的因素。

项目成果

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