リンパ浮腫におけるBiotubeを用いた新規治療法の開発

使用 Biotube 开发淋巴水肿新治疗方法

基本信息

批准号：
19K10031
负责人：
北山晋也
金额：
$ 2.25万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K10031/
关键词：
lymphedema biotube microsurgery regenerative medicine

项目摘要

2021年度までまでの研究により、biotubeの作成と大腿静脈への吻合・開存性に関して以下の結果を得ている。（１）収縮により樹脂の外径よりやや小さい内径となるものの、概ね外径に対応した内径のbiotubeが形成された。600μm程度の小口径の樹脂を用いた場合にbiotube周囲の炎症細胞浸潤と壁の肥厚が見られる例があり、至適口径や限界口径などが存在する可能性が示唆された。（２）開存率は50％（14部位中7部位）で、口径別では大腿動脈と口径差の少ない樹脂Bで最も高く（57％）、最も内径の小さい樹脂Cで最も低い（33%）結果であった。動脈にbiotubeを吻合した過去の報告よりも開存率は低く、flowの強さや樹脂の口径／表面性状などの影響を受けている可能性が示唆された。上記を受けて2020年度は移植後1か月のbiotubeを回収し、組織学的な解析を行った。HE・EVG・αSMA・CD34の各染色を行い、正常血管（動脈・静脈）を比較対象として以下の所見を得た。（３）正常血管では中膜にEVGやαSMAで染色される組織を認めたが、biotubeでは吻合前・後に関わらずそれらを認めず、中膜用組織の再構築は認めなかった。（４）開存を認めたbiotubeの内腔には正常血管よりも薄いもののCD34陽性細胞の層を認め、tube内の内膜化が起こっていることが示唆された。これらを受け、2021年度からはヒト／ラットリンパ管内皮細胞の特性解析等を行う計画とした。2021.22年と内皮細胞の培養に際して安定した培養条件や操作の模索を行ってきたが、COVID-19による影響を強く受けたこともあり、上記作業に時間を要している状況である。

通过截至 2021 年的研究，我们在生物管创建、股静脉吻合和通畅方面获得了以下结果。 (1)尽管由于收缩，内径变得略小于树脂的外径，但形成了内径大致对应于外径的生物管。当使用约600μm的小直径树脂时，曾有观察到生物管周围炎性细胞浸润和管壁增厚的情况，这表明可能存在最佳直径或极限直径。 (2) 通畅率为 50%（14 个部位中有 7 个部位），按口径来看，与股动脉口径差较小的树脂 B 最高（57%），树脂 B 最低（33%）。结果是树脂C，其内径最小。通畅率低于之前生物管与动脉吻合的报道，这表明它可能受到流动强度和树脂直径/表面特性的影响。针对上述情况，2020年，我们在移植后1个月收集生物管并进行组织学分析。我们进行了 HE、EVG、αSMA 和 CD34 染色，并将正常血管（动脉和静脉）与以下结果进行比较。 (3)正常血管中膜中观察到EVG和αSMA染色的组织，而生物管中无论吻合前后均未观察到EVG和αSMA染色的组织，也未观察到中膜组织的重建。 (4)在专利生物管的管腔内观察到一层CD34阳性细胞，尽管它比正常血管要薄，这表明管内发生了内膜形成。基于这些发现，我们计划从 2021 年开始对人/大鼠淋巴内皮细胞进行特征分析。 2021年和2022年，我们在培养内皮细胞时一直在寻找稳定的培养条件和操作，但由于COVID-19的强烈影响，上述工作需要时间。