生体内ゲノム編集を利用したHTLV-1を標的にする新規抗ウイルス療法

使用体内基因组编辑针对 HTLV-1 的新型抗病毒疗法

基本信息

批准号：
19K08870
负责人：
鈴木紳介
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒト T 細胞白血病ウイルス I 型 (Human T cell leukemia virus type I: HTLV-1) 由来の遺伝子を標的にし、体内ゲノム編集を利用した新規抗ウイルス療法の確立を目的とする。すべての HTLV-1 感染細胞で、3’側プロウイルスである、HTLV-1 bZIP factor (HBZ) 遺伝子は保存されいる。clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) /CRISPR-associated 9 (Cas9)システムは、感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子を極めて効率的に機能失活させうるゲノム編集ツールである。HBZ を標的にし機能失活を目的とした、2つのCRISPR/Cas9 guideRNAsを作成した。HTLV-1感染T細胞株と低悪性度ATL患者白血病細胞を用いて、HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入し、HBZ の欠失変異と変異効率を解析中である。HTLV-1感染T細胞株にNOTCH1蛋白が過剰発現しているが、阻害薬が増殖を抑制しないことを報告した。一方、HBZ mRNAは、蛋白質をコードするだけではなく、機能を有するbifunctional RNAであることも示されている。HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入した、CMVプロモーター依存性アデノウイルスベクターも作成中である。感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子をCRISPR/Cas9 ゲノム編集ツールを用いて、極めて効率的に機能失活させることが、発がんウイルスへの抗ウイルス療法の確立に重要と考えている。

人类T细胞白血病病毒I型（人类T细胞白血病I型：HTLV-1）的靶向基因，旨在使用人体基因组编辑来建立一种新的抗病毒疗法。所有HTLV-1感染的细胞均以3'Side专业病毒（HTLV-1 BZIP因子（HBz）基因）保存。定期间隔的短静脉复合物（CRISPR） /CRISPR相关的9（CAS9）系统被掺入感染细胞中，并继续表达HBZ基因。为HBZ的目的创建了两个CRISPR/CAS9 GuiderNAS，目的是进行功能性聋人。使用HTLV-1感染的T细胞和低恶性ATL患者白血病细胞，已经引入了由HBZ靶向的CRISPR/CAS9 GRNA，以分析HBZ的损失突变和可变性效率。据报道，Notch1蛋白在HTLV-1感染的T细胞储备中过量过多，但抑制剂不会抑制增殖。另一方面，HBZ mRNA不仅编码蛋白质，而且还表明它是具有功能的功能性RNA。还创建了引入CRISPR/CAS9 GRNA靶向HBZ的CMV启动子依赖性腺病毒载体。我们认为，使用CRISPR/CAS9基因组编辑工具（纳入感染细胞）的CRISPR/CAS9基因组编辑工具建立抗病毒疗法很重要。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Gamma-secretase inhibitor does not induce cytotoxicity in adult T-cell leukemia cell lines despite NOTCH1 expression.

DOI：
10.1186/s12885-022-10003-w
发表时间：
2022-10-15
期刊：
BMC cancer
影响因子：
3.8
作者：
通讯作者：

A survivin-responsive, conditionally replicating adenovirus induces potent cytocidal effects in adult T-cell leukemia/lymphoma

生存素反应性条件复制腺病毒在成人 T 细胞白血病/淋巴瘤中诱导有效的杀细胞作用

DOI：
10.1186/s12885-019-5730-1
发表时间：
2019
期刊：
BMC Cancer
影响因子：
3.8
作者：
Suzuki Shinsuke;Kofune Hiroki;Uozumi Kimiharu;Yoshimitsu Makoto;Arima Naomichi;Ishitsuka Kenji;Ueno Shin-ichi;Kosai Ken-ichiro
通讯作者：
Kosai Ken-ichiro