ゲノム編集法に基づく生体内網羅的スクリーニング法の確立とT細胞生成機構の理解

基于基因组编辑方法建立体内综合筛选方法及了解T细胞生成机制

基本信息

批准号：
19J00248
负责人：
室龍之介
金额：
$ 3.08万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J00248/
关键词：
胸腺 T細胞胸腺上皮細胞 sgRNA CRISPR/Cas9 スクリーニング

项目摘要

これまでの成果から胸腺細胞の分化に関与しうる遺伝子群が同定された。本研究を進める過程で、遺伝子Xを胸腺上皮細胞特異的に欠損するマウス(X-cKOマウス)が作成された。X-cKOマウスは、胸腺の低形成や胸腺T細胞分化の障害を示したことから、その原因を究明する必要が生じた。よって、胸腺細胞の分化を支持する間質細胞に軸足をおいた研究も進めた。公共のデータベースおよび既報の遺伝子発現データを独自に解析した結果、遺伝子Xは胸腺上皮細胞の中でも胸腺髄質上皮細胞(mTEC)に高発現することが示された。そこで、X-cKOマウスのmTECを解析した結果、mTECの分化が顕著に障害されていた。mTECを精製し、Bulk-RNA sequence解析を行なったところ、遺伝子Xを欠損するmTECでは、数千の遺伝子が有意に発現低下したが、発現上昇する遺伝子はわずかであった。過去の報告からmTECは自己反応性T細胞の排除に重要であることが示されている。したがって、今後、X-cKOマウスにおける胸腺T細胞のレパトア変化や自己免疫疾患の発症について詳細に検証する必要がある。

根据迄今为止获得的结果，已经鉴定了一组可参与胸腺细胞分化的基因。在这项研究过程中，创建了胸腺上皮细胞中特异缺乏 X 基因的小鼠（X-cKO 小鼠）。 X-cKO 小鼠表现出胸腺发育不全和胸腺 T 细胞分化受损，促使我们调查其原因。因此，我们还将研究重点放在支持胸腺细胞分化的基质细胞上。对公共数据库和之前发表的基因表达数据的独立分析表明，X基因在胸腺上皮细胞中的胸腺髓质上皮细胞（mTEC）中高表达。因此，对 X-cKO 小鼠 mTEC 的分析表明，mTEC 分化显着受损。当纯化 mTEC 并进行批量 RNA 序列分析时，在缺乏 X 基因的 mTEC 中，数千个基因的表达显着降低，但只有少数基因上调。之前的报告表明，mTEC 在消除自身反应性 T 细胞方面发挥着重要作用。因此，今后有必要详细研究X-cKO小鼠胸腺T细胞库的变化以及自身免疫性疾病的发生情况。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Retroviral Gene Transduction into T Cell Progenitors for Analysis of T Cell Development in the Thymus

逆转录病毒基因转导至 T 细胞祖细胞以分析胸腺中 T 细胞的发育

DOI：
10.1007/978-1-0716-0266-9_16
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
Muro Ryunosuke;Takayanagi Hiroshi;Nitta Takeshi
通讯作者：
Nitta Takeshi

中枢性免疫寛容の成立におけるアルギニンメチル基転移酵素の意義

精氨酸甲基转移酶在中枢免疫耐受建立中的意义

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
室龍之介;新田剛;高柳広
通讯作者：
高柳広

アルギニンメチル化による中枢性免疫寛容の確立

通过精氨酸甲基化建立中枢免疫耐受

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
室龍之介;新田剛;高柳広
通讯作者：
高柳広

tepwise cell fate decision pathways during osteoclastogenesis at single-cell resolution.

单细胞分辨率下破骨细胞生成过程中逐步细胞命运决定途径。

DOI：
10.1038/s42255-020-00318-y
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
20.8
作者：
Tsukasaki M; Huynh NC; Okamoto K; Muro R; Terashima A; Kurikawa Y; Komatsu N; Pluemsakunthai W; Nitta T; Abe T; Kiyonari H; Okamura T; Sakai M; Matsukawa T; Matsumoto M; Kobayashi Y; Penninger JM; Takayanagi H
通讯作者：
Takayanagi H

OPG Production Matters Where It Happened.

OPG 生产无论在哪里都至关重要。

DOI：
10.1016/j.celrep.2020.108124
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
8.8
作者：
Tsukasaki M; Asano T; Muro R; Huynh NC; Komatsu N; Okamoto K; Nakano K; Okamura T; Nitta T; Takayanagi H
通讯作者：
Takayanagi H