バクテリオファージの産業利用を目指したファージバンクの構築

建立工业噬菌体噬菌体库

• 批准号: 19K07146
• 负责人: 稲葉 桂子
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K07146/
• 关键词: バクテリオファージ; 薬剤耐性菌; ファージバンク; ファージセラピー; 流入下水; 緑膿菌; 口腔内細菌; 細菌叢編集; ファージ療法

細菌感染症治療の現場で多剤耐性化して世界的に問題になっている細菌として、黄色ブドウ球菌、クレブシエラ属菌、アシネトバクター属菌、緑膿菌などがある。これらの多剤耐性菌を殺菌できるファージの収集・特性解析およびバンク化は多剤耐性菌感染症治療に向けて非常に重要である。今年度は前年度に引き続き、それらの多剤耐性菌に感染できるファージの探索を行なった。系統的に多様で薬剤耐性株が含まれる菌株を使いながら、薬剤耐性株を殺菌できるファージを中心に探索を進めた。ファージ探索には岐阜市とその周辺地域から採取した流入下水を用いた。上記の株を宿主としてファージ探索を行なった結果、新たに60種類以上のファージを得ることができた。下水サンプルと標的宿主菌の前培養の際、従来はガラス試験管で行なっていたが、マイクロタイタープレートに変更することで、一度に扱うことができるサンプル数が多くなり、昨年度より多くのファージを得られるようになった。さらに、寒天プレート上でファージを検出する際に使用するソフトアガロースの濃度を下げることで、より多種類、かつこれまでと異なる特徴を保持するファージを収集できるようになった。ファージ探索と並行して、これまで収集したファージの特徴づけを行なった。多数の臨床分離株を用いて殺菌活性測定をハイスループットに行い、ファージ感染の有無と感染の程度を明らかにした。感染の宿主域が広いファージについては全ゲノム解析を行った。次年度も引き続き薬剤耐性菌に感染できるファージの収集に注力したいと考えている。

在细菌感染的治疗中已产生多重耐药性并已成为世界性问题的细菌包括金黄色葡萄球菌、克雷伯菌属、不动杆菌属和铜绿假单胞菌。能够杀死这些多重耐药细菌的噬菌体的收集、表征和储存对于多重耐药细菌感染的治疗极其重要。今年，继去年之后，我们继续寻找能够感染这些多重耐药细菌的噬菌体。使用系统发育多样化且包括耐药菌株的菌株，研究重点是可以杀死耐药菌株的噬菌体。使用从岐阜市及周边地区收集的流入污水进行噬菌体检测。以上述菌株为宿主寻找噬菌体，获得60余种新型噬菌体。以前，污水样本和目标宿主细菌是在玻璃试管中预培养的，但通过改为微量滴定板，我们能够一次处理更多的样本，并且我们能够收集到比去年更多的噬菌体。此外，通过降低用于检测琼脂平板上噬菌体的软琼脂糖的浓度，可以收集比以往更多种具有不同特征的噬菌体。在噬菌体搜索的同时，我们对迄今为止收集的噬菌体进行了表征。我们使用大量临床分离株进行了高通量杀菌活性测量，以明确噬菌体感染的存在与否以及感染的程度。对具有广泛感染宿主范围的噬菌体进行全基因组分析。明年，我们希望继续专注于收集能够感染耐药细菌的噬菌体。

项目成果

T系ファージが必要とする宿主遺伝子の網羅的解析

T谱系噬菌体所需宿主基因的综合分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 稲葉（長谷川）桂子，久堀智子，永井宏樹; 安藤弘樹
• 通讯作者: 安藤弘樹