脳機能を支えるポリシアル酸修飾された神経細胞接着分子の構造と機能の解明

阐明支持脑功能的聚唾液酸修饰的神经元细胞粘附分子的结构和功能

基本信息

批准号：
19J15553
负责人：
森愛理
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J15553/
关键词：
ポリシアル酸糖鎖精神疾患神経

项目摘要

今年度は以下の2点の研究課題について、研究を実施した。（１）硫酸化糖鎖が関与するポリシアル酸(polySia)構造の新たな制御機構の解明：神経細胞を用いた実験系を用いて、硫酸化糖鎖生合成酵素発現下でポリシアル酸転移酵素(polyST)が生合成するポリシアル酸量が減少することが見出された。また、実際の生体脳において、硫酸化糖鎖によるポリシアル酸の制御が起こっているのかを証明するため、免疫沈降実験を用いてマウス胎児脳、成体脳における神経細胞接着分子(NCAM)およびpolySia-NCAM上の糖鎖構造を解析した。その結果、異なる糖鎖構造が異なるNCAMアイソフォーム上に存在することが見出され、硫酸化糖鎖によるポリシアル酸の制御機構はNCAMのアイソフォームの発現にも影響を与えていることが示された。（２）ポリシアル酸転移酵素が関与するポリシアル酸構造の制御機構の解明：HEK293T細胞を用いて、STX単発現、PST単発現、STX(SNP-7)(統合失調症型)、STX-PST共発現、STX(SNP-7)-PST共発現由来の分泌型polySia-NCAM-Fcを精製した。昨年度に引き続き、詳細な構造解析を進めた結果、シアル酸の結合様式やコアの糖鎖構造に違いがあることが見出された。さらに、同じpolySia-NCAM-Fcを用いて、機能解析も行った。これまでに、単発現系のpolySia-NCAM-Fcが持つ機能を明らかにしてきたため、本年度はSTXとPSTの共発現系で得たpolySia-NCAM-Fcについての機能解析を行った。その結果、共発現系のpolySia-NCAMは、単発現系のpolySia-NCAMよりも、複雑にその機能が制御されていることが示唆された。

今年，我们对以下两个研究问题进行了研究。（1）用硫酸盐 - 氧化物 - 氧化氧化酶（多边形酸元元素（多边形氧化物），已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，已经发现，则发现量Polyst是生物抑制剂的政策酸的降低。此外，在实际的生物学大脑中，政策酸由硫酸盐链控制，因此它是小鼠胎儿脑（NCAM）和小鼠胎儿脑和polysia-中的polysia-。结果，已经发现它存在于具有不同糖链结构的不同NCAM同工型上，并且已经表明，硫酸盐的政策酸的控制机理也影响了NCAM同工型的表达。（2）使用HEK293T细胞，STX-PST表达式，STX（SNP -7） - 纯化了PPST分泌衍生的Polysia-NCAM-FC。由于去年的详细结构分析的结果，发现唾液酸的结合方式和核心糖链结构存在差异。此外，使用相同的polysia-nCAM-FC进行了功能分析。到目前为止，由于已经阐明了单发系统的Polysia-nCAM-FC功能，因此今年在STX和PST基于社区的系统中获得的Polysia-NCAM-FC的功能分析已于今年进行。结果，它表明功能性polysia-ncam比单发polysia-ncam更为复杂。