腸内細菌叢の情報を媒介する腸粘膜組織のｍｉｃｒｏＲＮＡ

肠粘膜组织中介导肠道菌群信息的 MicroRNA

基本信息

批准号：
19J10216
负责人：
逢坂文那
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J10216/
关键词：
プレバイオティクス腸内細菌叢 microRNA T細胞分化

项目摘要

本研究では、腸内細菌叢の情報を媒介するものとしてmiRNAの関与を想定したプレバイオティクスの作用機構の一端を解明することを目的とし、プレバイオティクスの発酵産物の一つである酪酸が大腸粘膜のT細胞におけるmiRNAの発現を変化させ、制御性T細胞を増加させるという仮説を検証した。難消化性オリゴ糖の摂取および腸内細菌叢の存在がマウスの大腸粘膜固有層単核球(LPL)のmiRNAプロファイルを変化させたというこれまでの知見から以下のように検証を進めた。腸内細菌叢の存在により増加したmiR-200ファミリーの標的遺伝子を同定するため、無菌（GF）マウスと通常（SPF）マウスから分離した大腸LPLのmRNAの発現プロファイルをマイクロアレイにより解析した。遺伝子オントロジー解析ならびにin silico解析による標的遺伝子予測の結果、miR-200ファミリーの標的遺伝子としてBcl11b、Ets1、Gbp7、Stat5b、Zeb1が予測された。それらのうち、Bcl11b、Ets1、およびZeb1は、腸管粘膜免疫の調節に寄与するIL-2をコードする遺伝子の転写因子であった。大腸LPLにおけるBCL11BおよびETS-1のタンパクレベルはGFマウスと比較してSPFマウスで低値を示したが、ZEB1のレベルに差は見られなかった。また、大腸LPLのIL-2産生レベルは、GFマウスに比べてSPFマウスで低値を示した。さらに、GFマウスとSPFマウスにおけるmiR-200ファミリーおよび標的遺伝子の発現ならびにIL-2産生の差異は、糞便細菌移植によってGFマウスに腸内細菌叢を再構築することにより消失した。miR-200ファミリーによる標的遺伝子の発現抑制を証明するため、マウスT細胞株にmiR-200a/-200b mimicを遺伝子導入したところ、標的遺伝子のmRNAおよびタンパクレベルは減少した。

这项研究旨在阐明益生元作用机理的一部分，该方法假设miRNA作为肠道菌群的介体的参与，并测试了丁酸丁酸的假设，即丁酸丁酸是益生元的发酵产物之一，改变了大型肠道粘膜中T细胞中miRNAS的表达。基于先前的发现，摄入不可消化的寡糖和肠道菌群的存在改变了小鼠粘膜层单核细胞（LPL）的miRNA谱，结果研究了结果如下。为了鉴定由肠道菌群的存在增加的miR-200家族的靶基因，通过微阵列分析了从无菌（GF）和正常（SPF）小鼠分离的结肠LPL的mRNA的表达谱。在计算机分析中，基因本体分析和靶基因预测的结果是，BCL11B，ETS1，GBP7，STAT5B和ZEB1被预测为miR-200家族的靶基因。其中，BCL11b，ETS1和ZEB1是编码IL-2的基因的转录因子，这有助于调节肠粘膜免疫。与GF小鼠相比，SPF小鼠中结肠LPL中BCL11b和ETS-1的蛋白质水平较低，但没有发现ZEB1水平差异。此外，与GF小鼠相比，SPF小鼠的结肠LPL的IL-2产生水平较低。此外，通过通过粪便细菌移植来重建GF小鼠中的肠道菌群，消除了GF和SPF小鼠中miR-200家族和靶基因和IL-2产生的表达差异。为了证明miR-200家族对靶基因表达的抑制，将miR-200A/-200B模拟转染到小鼠T细胞系中，从而导致靶基因的mRNA和蛋白质水平降低。

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

1-ケストース摂取により変化した大腸粘膜固有層単核球のmicroRNAの標的mRNAの解析

1-kestose 摄入改变的结肠固有层单核细胞中 microRNA 靶 mRNA 的分析

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
逢坂文那;門田　吉弘;栃尾　巧;園山　慶
通讯作者：
園山　慶

Gut commensals suppress interleukin-2 production through microRNA-200/BCL11B and microRNA-200/ETS-1 axes in lamina propria leukocytes of murine large intestine

肠道共生体通过小鼠大肠固有层白细胞中的 microRNA-200/BCL11B 和 microRNA-200/ETS-1 轴抑制白细胞介素 2 的产生

DOI：
10.1016/j.bbrc.2020.10.103
发表时间：
2021
期刊：
Biochemical and Biophysical Research Communications
影响因子：
3.1
作者：
Ohsaka Fumina;Karatsu Yugo;Kadota Yoshihiro;Tochio Takumi;Takemura Naoki;Sonoyama Kei
通讯作者：
Sonoyama Kei

大腸粘膜固有層単核球のmicroRNAの発現に影響を与える腸内細菌因子の探索

寻找影响结肠固有层单核细胞 microRNA 表达的肠道细菌因素