Positioning and differentiation of new neurons in the post-stroke brain

中风后大脑中新神经元的定位和分化

基本信息

批准号：
20H03565
负责人：
金子奈穂子
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Doshisha University (2022)Nagoya City University (2020-2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

１）新生ニューロンの移動・定着場所と分化、成熟の組織学的解析：（ⅰ）マウスの脳室下帯から新生ニューロン、神経前駆細胞、神経幹細胞を分取し、脳梗塞後の線条体に移植して、１0週間後にこれらの細胞の分布、各細胞のマーカータンパク質の発現を定量的に解析した。（ⅱ）マウス脳梗塞モデルを用いて、脳室下帯から脳梗塞巣へ移動する新生ニューロンの足場となる血管の性質について、詳細な解析を行った。脳梗塞後、さまざまなタイミングで増殖細胞を標識するBrdUを投与して、新生する血管、アストロサイトを標識した。新生血管、血管表面を被覆するアストロサイトの細胞数や形状と産生時期の関係などを定量的に解析した。２）新生ニューロンのシングルセル遺伝子発現解析：前年度に10xGenomics社のChromiumコントローラーを用いて作製した、分子バーコードで標識された各細胞由来のcDNAライブラリーを用いて、次世代シークエンサーで網羅的遺伝子発現解析を行った。過去に発表された論文を参考にして、細胞群の分類を行い、詳細な遺伝子発現変化を解析中である。３）バイオマテリアルを用いた新生ニューロンの移動促進：ニューロンの移動が大規模に行われる新生児期の脳において新生ニューロンは放射状グリアを足場に移動する。我々が発見した新生ニューロンー放射状グリアの相互作用に重要なN-cadherinという細胞接着因子を組み込み、脳内に注入後に自己集合して繊維状の構造をとる新たなバイオマテリアルを共同研究者とともに作成した。脳梗塞モデルマウスの脳内に注入し、新生ニューロンの移動を定量的に解析したところ、このバイオマテリアルに沿って脳梗塞巣へ移動する新生ニューロンが増加した。統計学的に有意なレベルには至らなかったが、神経機能に改善傾向が見られた。今後、生存・分化等のさまざまなステップをコントロールできる新たなマテリアルの開発を目指す。

1)新生神经元的定位、分化和成熟的组织学分析：(i)从小鼠脑室下区收集新生神经元、神经祖细胞和神经干细胞，并在脑梗塞后10年后收集在纹状体中。几周后，对这些细胞的分布以及每个细胞中标记蛋白的表达进行了定量分析。 (ii) 使用小鼠脑梗塞模型，我们对血管的特性进行了详细分析，这些血管充当新生神经元从脑室下区迁移到脑梗塞病灶的支架。脑梗塞后，在不同时间施用标记增殖细胞的BrdU来标记新形成的血管和星形胶质细胞。我们定量分析了新血管的数量和形状、覆盖血管表面的星形胶质细胞以及产生时间之间的关系。 2) 新生神经元的单细胞基因表达分析：使用下一代测序仪使用前一年使用 10xGenomics 的 Chromium 控制器创建的带有分子条形码的每个细胞的 cDNA 文库进行综合基因表达分析。根据之前发表的论文，我们正在对细胞群进行分类并分析基因表达的详细变化。 3）利用生物材料促进新生神经元的迁移：在神经元大规模迁移的新生儿大脑中，新生神经元利用放射状胶质细胞作为支架进行迁移。我们与合作者一起创造了一种新的生物材料，其中包含一种称为 N-钙粘蛋白的细胞粘附因子，该因子对于新生神经元和放射状胶质细胞之间的相互作用非常重要，并且在注射到大脑后会自组装成纤维结构。当将生物材料注射到脑梗死模型小鼠的大脑中并定量分析新生神经元的迁移时，沿着生物材料迁移到脑梗死病灶的新生神经元的数量增加。尽管这没有达到统计学上显着的水平，但神经功能有改善的趋势。未来，我们的目标是开发能够控制生存和分化等各个步骤的新材料。

项目成果

期刊论文数量（37）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

バレンシア大学(スペイン)

瓦伦西亚大学（西班牙）

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Metabolic fingerprints of fear memory consolidation during sleep

睡眠期间恐惧记忆巩固的代谢指纹

DOI：
10.1186/s13041-021-00733-6
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
3.6
作者：
Koyanagi I; Sonomura K; Naoi T; Ohnishi T; Kaneko N; Sawamoto K; Sato TA; Sakaguchi M
通讯作者：
Sakaguchi M

成体脳内の神経幹細胞の分化と傷害脳の再生

成人大脑中神经干细胞的分化和受损大脑的再生