Development of BRD4/CBP/p300 multi-bromodomain inhibitors for MLL-rearranged pediatric acute lymphoblastic leukemia

BRD4/CBP/p300 多溴结构域抑制剂的开发用于治疗 MLL 重排的小儿急性淋巴细胞白血病

基本信息

批准号：
20J22374
负责人：
今吉菜月
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyoto University (2022)Kyoto Pharmaceutical University (2020-2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J22374/
关键词：
BET MLL CBP/p300 ブロモドメインポリファーマコロジー

项目摘要

本研究では、未だに予後不良のMLL遺伝子再構成陽性乳児・小児急性リンパ芽球性白血病（MLL-r ALL）において、エピジェネティクス制御に基づいた新規治療法開発を目指し、新規BET阻害剤開発と新規治療法の提示を目的とする。本年度は、主に以下の2つの議題を実施した。①新規BET阻害剤における詳細な作用メカニズム解析：作用メカニズム解析に向けて、臨床試験が行われている既存のBET阻害剤（OTX015）とCBP/p300タンパク質のブロモドメインも阻害する新規BET阻害剤の有効性や安全性をさらに評価した。具体的には、昨年度までに有効性や安全性の評価を行ってきた新規BET阻害剤の結果を踏まえ、ヒトMLL-r ALL細胞株を用いた正所性担がんモデルマウスにOTX015を投与した。その結果、OTX015群は無治療群との全生存期間における有意差は確認できず、血小板数の減少傾向が確認された。加えて、各阻害剤を含む培地下で正常マウスにおける骨髄細胞を培養し、CFC assayを実施した。その結果、OTX015では顕著に単球や好中球などの細胞数が減少し、造血系細胞に対する有害作用を強く示す可能性が明らかとなった。これらの結果から、新規BET阻害剤が、有効性や安全性が高い可能性が示唆されたため、既存のBRD4阻害剤、CBP/p300ブロモドメイン阻害剤を用いて、②に示す検討を行うこととした。②BRD4およびCBP/p300における作用メカニズムと抗腫瘍効果の関連性の解明：既存のBRD4阻害剤およびCBP/p300ブロモドメイン阻害剤の併用は、ヒトMLL-r ALL細胞株に対し、相乗的に細胞増殖抑制効果を示し、マルチブロモドメイン阻害の有効性が重要であることが明らかになった。なお、本研究の中で明らかにできなかった具体的な作用機序については、今後の研究課題とする。

在本研究中，我们旨在针对MLL基因重排阳性的婴儿/儿童急性淋巴细胞白血病（MLL-r ALL）开发一种基于表观遗传调控的新治疗方法，该种疾病的预后仍然较差，并旨在开发一种新型BET抑制剂目的是提出新的治疗方法。今年，我们主要开展了以下两个课题。 ①新型BET抑制剂的详细作用机制分析：为了分析作用机制，我们将比较一种目前正在进行临床试验的现有BET抑制剂（OTX015）和一种同样抑制CBP/p300蛋白溴结构域的新型BET抑制剂的功效和作用。安全性得到进一步评估。具体而言，基于截至去年已评估有效性和安全性的新型BET抑制剂的结果，OTX015将被施用给使用人MLL-r ALL细胞系的原位肿瘤模型小鼠。结果，OTX015组和未治疗组之间的总生存时间没有显着差异，并且证实了血小板计数的下降趋势。另外，将正常小鼠的骨髓细胞在含有各抑制剂的培养基中培养，进行CFC测定。结果，OTX015显着减少了单核细胞和中性粒细胞等细胞的数量，很明显OTX015可能对造血细胞产生强烈的不利影响。这些结果表明新型BET抑制剂可能具有较高的有效性和安全性，因此我们决定使用现有的BRD4抑制剂和CBP/p300溴结构域抑制剂进行如图2所示的研究。 ②阐明BRD4和CBP/p300的作用机制与抗肿瘤作用的关系：现有的BRD4抑制剂和CBP/p300溴结构域抑制剂联合使用可协同增加人MLL-r ALL细胞系的细胞增殖，显示出抑制作用。很明显，多溴结构域抑制的有效性非常重要。本研究未能阐明的具体作用机制将是未来研究的主题。