細胞膜と細胞外構造体の協調的相互作用によるTORC2シグナルの活性制御モデル

通过细胞膜和细胞外结构之间的协同相互作用调节TORC2信号活性的模型

• 批准号: 21H02103
• 负责人: 井上 善晴
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02103/
• 关键词: 酵母; TORC2; CWI経路; Eisosome; 含硫アミノ酸; Pkc1; Plc1; メチルグリオキサール; シグナル伝達; 細胞膜脂質ドメイン

これまでの研究から、Cell Wall Integrity（CWI）経路の活性化はTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化に対して抑制的に作用していること、すなわち、オーレオバシジンA（AbA）によるTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化は、CWI経路を介して活性化されたPkc1により抑制され得ることを明らかにしてきた。そこで本年度は、TORC2シグナルによるPkc1の活性化について検討を行った。今回、tor2-ts温度感受性変異株の温度感受性をマルチコピーで抑圧することが知られているPlc1に着目して検討を行った。Plc1の欠損株はTORC2-Pkc1シグナルを活性化させるメチルグリオキサール（MG）やTORC2-Ypk1/2シグナルを活性化させるAbAに対して感受性を示した。また、plc1欠損株ではMGやAbA処理によるTORC2-Pkc1ならびにTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化も起こらなかった。しかしながら、ホスホリパーゼ活性のないPlc1-H393A/N394A変異体では、AbAによるTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化は起こったが、MGによるTORC2-Pkc1シグナルの活性化は起こらなかった。そこで、Pkc1のTORC2によるリン酸化部位であるS1143のリン酸化を検討したところ、plc1欠損株ではMG処理によるPkc1-S1143のリン酸化が起こらなかった。Pkc1の下流にはMpk1 MAPキナーゼ経路が存在する。MG処理によりTORC2-Pkc1経路を介してMpk1のリン酸化が起こるが、plc1欠損株ではMGによるMpk1のリン酸化が起こらなかったのに対し、熱ショックによるCWI経路を介したMpk1のリン酸化は野生株と同様に起こった。Plc1がPkc1の局在に及ぼす影響を検討した結果、plc1欠損株やPlc1-H393A/N394A変異体では芽の先端に局在するPkc1の割合が顕著に低下していた。

前期研究表明，细胞壁完整性（CWI）通路的激活对TORC2-Ypk1/2信号的激活有抑制作用；我们发现，通过CWI通路激活的Pkc1可以抑制Ypk1/2信号的激活； 。因此，今年，我们研究了TORC2信号对Pkc1的激活。这次，我们关注的是 Plc1，已知它可以通过多拷贝抑制 tor2-ts 温度敏感突变体的温度敏感性。 Plc1 缺陷菌株对激活 TORC2-Pkc1 信号的甲基乙二醛 (MG) 和激活 TORC2-Ypk1/2 信号的 AbA 敏感。此外，在 plc1 缺陷菌株中，TORC2-Pkc1 和 TORC2-Ypk1/2 信号未被 MG 或 AbA 处理激活。然而，在缺乏磷脂酶活性的Plc1-H393A/N394A突变体中，发生了AbA对TORC2-Ypk1/2信号的激活，但未发生MG对TORC2-Pkc1信号的激活。因此，当我们检查TORC2对Pkc1的磷酸化位点S1143的磷酸化时，我们发现在plc1缺陷菌株中MG处理并没有引起Pkc1-S1143的磷酸化。 Mpk1 MAP 激酶途径存在于 Pkc1 的下游。 MG处理通过TORC2-Pkc1途径引起Mpk1磷酸化，但MG诱导的Mpk1磷酸化在plc1缺陷菌株中并未发生，而由于热激导致的CWI途径Mpk1磷酸化在plc1缺陷菌株中并未发生股票也发生了同样的情况。检查 Plc1 对 Pkc1 定位的影响，我们发现在 plc1 缺陷菌株和 Plc1-H393A/N394A 突变体中，位于芽尖的 Pkc1 比例显着降低。

项目成果

Methylglyoxal induces multiple serine phosphorylation in insulin receptor substrate 1 via the TAK1-p38-mTORC1 signaling axis in adipocytes

甲基乙二醛通过脂肪细胞中的 TAK1-p38-mTORC1 信号轴诱导胰岛素受体底物 1 中的多重丝氨酸磷酸化

• DOI: 10.1042/bcj20220271
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 4.1
• 作者: Ng Su;Nomura Wataru;Takahashi Haruya;Inoue Kazuo;Kawada Teruo;Goto Tsuyoshi;Inoue Yoshiharu
• 通讯作者: Inoue Yoshiharu

Saccharomyces cerevisiaeのプロテインキナーゼCにおけるHR1領域の機能解析

酿酒酵母蛋白激酶C HR1区功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 井澗和也;野村 亘;井上善晴
• 通讯作者: 井上善晴

出芽酵母CWI経路はeisosome依存的にTOR複合体2シグナルを負に制御する

酿酒酵母 CWI 通路以 eisosome 依赖性方式负向调节 TOR 复合物 2 信号传导

• 发表时间: 2022
• 作者: 野村 亘;井上善晴
• 通讯作者: 井上善晴

ε-ポリ-L-リジンによる酵母Mpk1 MAPキナーゼの活性化と抗真菌活性の相関性

ε-聚-L-赖氨酸激活酵母 Mpk1 MAP 激酶与抗真菌活性的相关性

• 发表时间: 2022
• 作者: 栗原優紀;福井健人;池田佳代;野村 亘;竹原宗範;井上善晴
• 通讯作者: 井上善晴

Global landscape of protein complexes in the yeast Saccharomyces cerevisiae

• DOI: 10.1038/nature04670
• 发表时间: 2006-03-30
• 期刊: Nature
• 影响因子: 64.8
• 作者: N. Krogan;G. Cagney;Haiyuan Yu;Gouqing Zhong;Xinghua Guo;A. Ignatchenko;Joyce Li;S. Pu;Nira Datt
• 通讯作者: Nira Datt