EGFR経路とTGFβシグナル経路のクロストークに着目した新規の瘢痕抑制の研究

聚焦 EGFR 通路与 TGFβ 信号通路串扰的新型疤痕抑制研究

• 批准号: 19K18850
• 负责人: 二出川 弘樹
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18850/
• 关键词: アンフィレギュリン; 創傷治癒; EGFR; amphiregulin

AREGノックアウトマウスを用い、角膜アルカリ外傷の創傷治癒の検討を行った。・直径2mmの円形の濾紙を0.1mMのNaClに浸し、腹腔麻酔下にAREGノックアウトマウス、およびワイルドタイプ(C57/B6)のマウスの角膜の中央部に1分間留置し角膜アルカリ外傷を作成した。処置後2、5、10、20日後において前眼部創傷治癒過程を観察し、創傷の治癒過程をデジタルカメラで撮影した。しかし、遺伝子型を確定することができ、実際に実験に使用できたAREGノックアウトマウスの頭数が少なかったため、また創傷のサイズ、深さにばらつきが大きかったこともあり、治癒過程に有意な差を見いだせなかった。また、AREGノックアウトマウスが十分に得られた場合、追加で以下の実験を予定していた。・アルカリに浸した濾紙で同様に片眼の角膜中央部にアルカリ外傷を起こした後、2、5、10、20日後において、眼球摘出を行い、パラフィン切片での免疫組織化学と角結膜からのRNA抽出によるrtPCRを行い、TGF、SMA、fibronectin、各種collagen分子、F4/80抗原、MCP-1などの炎症、瘢痕化に関連する遺伝子・蛋白質発現とEGFRのリガンドであるEGF、Anphiregulin、TGF、HB-EGFの遺伝子、蛋白質発現を確かめる。しかし、こちらも同様に遺伝子型を確定できたAREG1ノックアウトマウスのサンプルが十分に集まらなかったため中止となった。

使用 AREG 基因敲除小鼠研究了角膜碱损伤造成的伤口愈合。 - 将直径为2毫米的圆形滤纸浸入0.1 mM NaCl中，在腹腔麻醉下置于AREG敲除小鼠和野生型（C57/B6）小鼠的角膜中央1分钟，使角膜呈碱性创伤。治疗后2、5、10、20天观察眼前段伤口愈合过程，并用数码相机拍摄伤口愈合过程。然而，由于可以确定基因型并实际用于实验的AREG基因敲除小鼠的数量很少，而且伤口的大小和深度差异很大，因此我无法观察到愈合过程是否存在显着差异。找不到它。此外，如果获得足够的 AREG 敲除小鼠，则计划进行以下额外实验。・用浸有碱的滤纸对一只眼睛的中央角膜进行同样的碱创伤后，2、5、10、20天后摘除眼球，对石蜡切片和角膜结膜进行免疫组织化学，通过RNA进行rtPCR提取，并进行 TGF、SMA 和 fibr。我们将确认与炎症和疤痕相关的基因和蛋白的表达，如连蛋白、各种胶原蛋白分子、F4/80抗原和MCP-1，以及EGFR配体EGF、双调蛋白、TGF和HB-EGF。但由于可确定基因型的AREG1敲除小鼠样本不足，该项目也被取消。