新規創薬に向けたN6-メチルアデノシトシン修飾の肝細胞癌における意義の解明

阐明肝细胞癌中 N6-甲基腺胞嘧啶修饰对新药发现的意义

• 批准号: 19K18110
• 负责人: 園原 史訓
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18110/
• 关键词: 肝細胞癌; N6メチルアデノシトシン; ALKBH5; RNAメチル化; 予後因子; バイオマーカー; N6-メチルアデノシトシン修飾; 肝細胞癌; N6メチルアデノシトシン; ALKBH5; RNAメチル化; 予後因子; バイオマーカー; N6-メチルアデノシトシン修飾

肝細胞癌（HCC)では腫瘍の悪性度に加え,発生母地としての背景肝の分子生物学的異常もHCC再発に関わるため、本研究ではRNAメチル化で最もよく見られるN6メチルアデノシトシン (m6A)およびその関連遺伝子についてHCC腫瘍部と非腫瘍部における発現状況の違いと臨床的意義について検討した.当科のHCC症例はHBV 41例(23％),HCV 106例(60%),非BCが30例(17％)だった.切除標本の腫瘍部・非腫瘍部で全RNAにおける m6A定量解析では有意差を認めなかった(P=0.79).予後解析の結果,非腫瘍部のm6Aメチル化高低と予後に関連を認めなかったが,腫瘍部のm6Aメチル化高値は予後不良なRFSとOSに関係していた.TCGAの遺伝子発現情報を用い,m6Aに関連する遺伝子の発現状況を調査した.m6Aの脱メチル化酵素であるFTOとALKBH5は非腫瘍部と比較して腫瘍部で有意に発現が低下していた(P<0.001, P=0.02).さらに,ALKBH5の発現低値群は有意差はないものの,RFSが不良な傾向だった.当科のHCCの腫瘍部,非腫瘍部での遺伝子発現を定量PCRで解析すると,ALKBH5,FTOともに腫瘍部で有意に発現が低かった(ともにP<0.001).ALKBH5発現について予後解析を行うと,腫瘍部の発現低値群のRFSは有意に不良だった(P=0.003).さらに非腫瘍部の発現低値群は高値群に比べて有意に予後不良なRFSであり, OSでも有意差は認めないものの,予後不良の傾向だった.ALKBH5の高低で臨床病理学的所見を比較すると年齢65歳未満,とステージIII以上の割合がALKBH5低発現群で有意に高かった.さらに,Cox比例ハザードモデルによる単変量/多変量解析では非腫瘍部のALKBH5発現低値は静脈浸潤と並び,独立した有意な予後因子として抽出された.

除了HCC（HCC）中肿瘤的恶性肿瘤外，作为肝脏起源的分子生物学异常也参与了HCC复发。在这项研究中，我们研究了N6甲基腺苷替肽（M6A）的表达状态和临床意义的差异，该N6甲基腺苷（M6A）在RNA甲基化中最常见，其相关基因及其相关基因以及HCC肿瘤和非肿瘤区域的临床意义。我们部门的HCC病例为41例（23％），HCV 106例（60％）和30例非BC病例（17％）。在M6A的定量分析中未观察到显着差异（p = 0.79）。预后分析表明，非肿瘤区域中的高和低M6A甲基化没有关联，但是肿瘤区域的高M6A甲基化与RFS和OS有关，RFS和OS的预后较差。使用TCGA基因表达信息，研究了与M6a相关基因的表达状态。与非肿瘤区域相比，肿瘤区域中M6a脱甲基酶FTO和ALKBH5的表达显着降低（p <0.001）。 p = 0.02）。此外，尽管低级ALKBH5表达组没有显着差异，但RF往往很差。当通过定量PCR分析HCC肿瘤和非肿瘤区域中的基因表达时，肿瘤区域的ALKBH5和FTO都显着降低了ALKBH5和FTO（均P <0.001）。当对ALKBH5表达进行预后分析时，低水平肿瘤区域的RF明显较差（P = 0.003）。此外，低水平的肿瘤区域明显比高级组差。尽管OS没有显着差异，但预后不良的趋势。在比较高和低ALKBH5的临床病理发现时，在AlkBH5表达低的组中，65岁以下的年龄和高于第三阶段的人的百分比明显更高。此外，在使用COX比例危害模型的单变量/多变量分析中，非肿瘤区域中低的AlkBH5表达被提取为独立的，重要的预后因素，以及静脉浸润。