ヒトCD25刺激によるヒト化マウスを用いた新規間質性肺炎モデルの病態解明

使用人 CD25 刺激的人源化小鼠阐明新型间质性肺炎模型的病理学

基本信息

批准号：
19K17641
负责人：
爲近真也
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、ヒト化マウスにヒトCD25(hCD25)を刺激をすることで急性肺障害(ALI)が生じるモデルマウスを用いて、hCD25刺激により急性に生じるヒトALI病態の解明を行うことが目的である。hCD25刺激のために、ヒトIL-2（hIL-2）と抗hIL-2抗体(clone 5344)によるhIL-2 complex（hIL-2cx）を使用した。これまでに、NOGマウスにヒト末梢血単核球(hPBMC)を静注後、day7にPBS、hIL-2cxを腹腔内に投与し、day 14に解剖し、肺に浸潤するhCD4+T細胞、hCD8+T細胞のヒト炎症性サイトカインの産生に関してフローサイトメトリーを用いて検討し、デキサメタゾン(Dex) 5mg/kg/日をday 9-13まで腹腔内に投与し、NOGマウスのALIに対する影響も調べた。その結果、hIL-2cxにより、肺に浸潤するhCD4+T細胞でのhIFN-γ、hIL-4、hTNF-αの産生、hCD8+T細胞でのhIFN-γ、GM-CSFの産生の有意な増加を認めたが、Dexにより有意な改善を認めなかった。さらに、PBSと比べて、hIL-2cxにより有意にヒト化マウスの生存率の低下や、day 14での肺病理にて肺炎像を認めたが、どちらもDex投与では有意な改善を認めなかった。そのため、本年度は、Dexに加えて、複数のサイトカインを抑制することができるマルチターゲット製剤であるJAK阻害薬をヒト化マウスに経口投与させ、ALIへの影響を検討した。JAK1/2阻害薬であるバリシチニブ(BARI) 10mg/kg/dayをday 9-13までDexに併用して投与したところ、hIL-2cx群と比べて、有意に生存率やday 14での肺病理が改善し、T cellでのGM-CSFの産生が低下が低下した。

本研究的目的是使用人源化小鼠中刺激人 CD25 (hCD25) 时发生急性肺损伤 (ALI) 的模型小鼠，阐明因 hCD25 刺激而急性发生的人 ALI 的病理学。对于hCD25刺激，使用hIL-2复合物(hIL-2cx)与人IL-2(hIL-2)和抗hIL-2抗体(克隆5344)。迄今为止，NOG小鼠已被腹腔注射人外周血单核细胞（hPBMC），然后在第7天腹腔注射PBS和hIL-2cx，在第14天解剖，hCD4+T细胞浸润到人的肺部中。使用流式细胞术研究了 hCD8+ T 细胞对炎症细胞因子的影响，并研究了地塞米松 (Dex) 5mg/kg/天。 9-13 点腹腔注射该药物，以检查对 NOG 小鼠 ALI 的影响。结果，hIL-2cx 显着减少了浸润肺部的 hCD4+ T 细胞产生的 hIFN-γ、hIL-4 和 hTNF-α，以及 hCD8+ T 细胞产生的 hIFN-γ 和 GM-CSF。观察到增加，但使用 Dex 没有观察到显着改善。此外，与 PBS 相比，hIL-2cx 显着降低了人源化小鼠的存活率，并且第 14 天的肺部病理学显示出肺炎迹象，但施用 Dex 后两者均没有显着改善。因此，今年，除了Dex之外，我们还给人源化小鼠口服了一种能够抑制多种细胞因子的多靶点药物JAK抑制剂，并检查了其对ALI的效果。当从第 9 天到第 13 天以 10 mg/kg/天的剂量联合使用 JAK1/2 抑制剂 baricitinib (BARI) 时，第 14 天的存活率和肺部病理学结果与 hIL-2cx 组相比显着降低。改善，T 细胞产生 GM-CSF 的下降减少。