Development of immunotherapy with carbonic anhydrase I for patients with ulcerative colitis

碳酸酐酶 I 治疗溃疡性结肠炎免疫疗法的进展

• 批准号: 19K17495
• 负责人: 八木 専
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K17495/
• 关键词: 炭酸脱水酵素Ⅰ; 潰瘍性大腸炎; 経口免疫寛容; 自己抗原; 炭酸脱水酵素I; 炎症性腸疾患; 腸管由来蛋白; 制御性T細胞

申請者らは今まで、炎症性腸疾患の病態に主要な役割を果たす盲腸細菌抗原の中で炭酸脱水酵素I(CAI)が病態に関与していることを同定し、炎症性腸疾患モデルマウスにおいて同抗原でパルスした制御性樹状細胞を用いた細胞療法と経口免疫寛容療法が腸炎を抑制にすることを報告した。CAIのアミノ酸配列の中で免疫応答を誘導するエピトープ領域を同定し、CAIペプチドをパルスした制御性樹状細胞を用いた細胞療法が腸炎抑制に有用であることを報告した。本申請研究ではヒトへの臨床応用のため、ヒト化CAI(hCAI)もしくはヒト化CAIペプチド抗原を用いて腸炎への有効性を示し、潰瘍性大腸炎に対する免疫療法の開発をめざしている。本年度は、ブレビバチルス発現系システムを用いて作成したCAI蛋白を用いて、潰瘍性大腸に対する既存治療薬である、5-アミノサリチルサン製剤、ステロイドとの比較検討試験を行った。 hCAI (0.3mg/day)、Mesalazine (100mg/kg)、PSL(2mg/kg)、PBSの4群において、経口免疫寛容療法を行った後CD4+CD25-T cell移入腸炎モデルマウスにおいて腸炎を誘発し腸炎発症の抑制効果を検討した。PBS群と比べてhCAI群、PSL群では腸管長が長く保たれ、体重低下も抑制できていた。組織学的にも同様に腸炎は抑制され、既存薬と比較しhCAIは少なくとも非劣勢の治療効果がみられることを確認できた。サイトカインの検討では、以前のマウス抗原のCAI(mCAI)の経口免疫寛容療法実験と比較すると効果は劣るものの、hCAⅠ投与でも炎症性サイトカイン（IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-17）の産生について抑制できていることを確認した。腸内細菌の検討も行ったが、そちらに関しては明らかな変化は指摘されなかった。

迄今为止，申请人已发现在炎症性肠病的病理学中起主要作用的盲肠细菌抗原中，碳酸酐酶I(CAI)参与了炎症性肠病的病理学报道，使用调节性树突状细胞进行细胞治疗。用相同抗原和口服免疫耐受疗法抑制了肠炎。我们鉴定了 CAI 氨基酸序列中的一个表位区域，该区域可诱导免疫反应，并报道使用 CAI 肽脉冲的调节性树突状细胞的细胞疗法可用于抑制肠炎。在这项提交的研究中，我们的目标是通过证明人源化 CAI (hCAI) 或人源化 CAI 肽抗原对肠炎的临床应用的有效性，开发溃疡性结肠炎的免疫疗法。今年，我们使用短芽孢杆菌表达系统创建的 CAI 蛋白与 5-氨基水杨聚糖制剂和类固醇（这是溃疡性结肠的现有治疗方法）进行了比较研究。 CD4+CD25-T细胞转移性肠炎模型小鼠经口服免疫耐受治疗后诱导肠炎，分四组：hCAI（0.3mg/天）、美沙拉嗪（100mg/kg）、PSL（2mg/kg）和PBS。研究了抑制肠炎发病的效果。与 PBS 组相比，hCAI 和 PSL 组保持了更长的肠道长度，并且能够抑制体重减轻。从组织学角度来看，小肠结肠炎也得到了类似的抑制，这证实 hCAI 与现有药物相比至少具有不逊色的治疗效果。在细胞因子的研究中，虽然与之前使用小鼠抗原CAI（mCAI）的口服免疫耐受治疗实验相比效果较差，但给予hCAI显示炎症细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-17 ) ) 生产被证实受到抑制。还对肠道细菌进行了研究，但没有发现明显的变化。

项目成果

消化管疾患の免疫学的研究

胃肠道疾病的免疫学研究

ヒト炭酸脱水酵素Ⅰを標的抗原とした経口免疫寛容療法による炎症性腸疾患発症の抑制

通过针对人碳酸酐酶 I 的口服免疫耐受疗法抑制炎症性肠病的发作

• 发表时间: 2019
• 作者: 丹下和洋;八木専;阿部雅則;竹下英次;池田宜央;日浅陽一
• 通讯作者: 日浅陽一