性フェロモンにより誘起される生殖内分泌・性行動の神経回路解明

阐明性信息素诱导的生殖内分泌和性行为的神经回路

基本信息

批准号：
19K16304
负责人：
梶山十和子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

（1）嗅覚受容体の同定　ゼブラフィッシュにおいて性フェロモン17,20β-PSには二つの受容体候補遺伝子があり、その二つが同一の嗅細胞において共発現することを示唆するデータが得られていた。本年度は嗅上皮におけるシングルセルRNAシークエンス解析により、性フェロモン受容体遺伝子の発現を詳細に解析した。その結果、二つの性フェロモン受容体候補遺伝子が実際に同一の細胞に発現していることが明らかになった。（2）行動・内分泌の変化の同定　前年度までに作出した性フェロモン受容体ノックアウトフィッシュ複数系統について育成を行った。また、性フェロモン刺激によるゼブラフィッシュの内分泌の変化を検出するための実験系の構築に取り組んだ。具体的には、下垂体における性腺刺激ホルモンのReal-time PCRによる定量、血中の性ステロイドホルモンの質量分析による定量の方法を検討した。（3）神経回路の解明　性フェロモンにより活性化されるニューロン群の性質を調べるためには、目的のニューロン群に発現するマーカー遺伝子の同定が重要である。しかし、ゼブラフィッシュにおいては、マーカー遺伝子の探索に有用な、成魚の脳における遺伝子発現アトラスが整備されていない。そこで、ゼブラフィッシュの成魚脳における38種類の神経ペプチドおよび、神経伝達物質マーカー遺伝子の発現場所を網羅的に可視化し、断面ごとにまとめた。さらにこのデータをもとに、これまで一つの神経核とされていた領域内に、神経ペプチドの発現が異なる2つ以上の領域がある箇所を複数見出し、神経亜核として提案した。また、ゼブラフィッシュ視床下部の神経ペプチド発現をマウスの発現と比較し、類似した発現パターンを示す神経核を複数見出した。以上の内容を論文にまとめ、投稿、プレプリントの公開を行った。また、結果の全スライドグラスのデジタルデータを参照しやすいデータベースとして公開した。

（1）鉴定斑马鱼中的嗅觉受体，有两个用于性信息素17和20β-PS的候选受体基因，并获得了数据，这表明两者在同一嗅觉细胞中共表达。今年，我们通过嗅觉上皮中的单细胞RNA测序分析分析了性信息素受体基因的表达。结果，发现两个候选性信息素受体基因实际上在同一细胞中表达。（2）鉴定行为和内分泌变化：培养了到上一年产生的多种性信息素受体基因敲除鱼。我们还研究了一个实验系统的构建，以检测由于性信息素刺激而导致斑马鱼内分泌的变化。具体而言，我们研究了使用实时PCR和血液中性类固醇激素的实时PCR和质谱法对垂体中促性腺激素进行定量的方法。（3）阐明神经回路：为了研究性信息素激活的神经元组的特性，重要的是鉴定在神经元兴趣组中表达的标记基因。然而，在斑马鱼中，尚未开发出针对搜索标记基因的成年大脑中的基因表达图集。因此，我们全面地看到了成年斑马鱼大脑中38种类型的神经肽和神经递质标记基因的表达位置，并按截面总结了它们。此外，根据这些数据，我们在以前被认为是单个神经核的区域中发现了多个位置，其中发现了两个或多个具有不同神经肽表达的区域，并提出为神经元亚核。此外，将斑马鱼下丘脑中的神经肽表达与小鼠的表达进行了比较，并发现了几个表现出相似表达模式的神经元核。上述信息已将其编译成论文，提交，并发布了预印本。此外，所有结果幻灯镜的数字数据已作为易于参考的数据库发布。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ゼブラフィッシュ脳内の神経ペプチド発現アトラス /研究者の出産育児ガイドゼブラフィッシュ脳内の神経ペプチド発現アトラス/研究者の出産育児ガイド

斑马鱼大脑中神经肽表达图谱/分娩和育儿研究人员指南斑马鱼大脑中神经肽表达图谱/分娩和育儿研究人员指南

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Towako Kajiyama;Yoshihiro Yoshihara;梶山十和子
通讯作者：
梶山十和子

Neuropeptide expression atlas in the adult zebrafish hypothalamus - definition of subnuclei and comparison with mammals -

成年斑马鱼下丘脑神经肽表达图谱-亚核的定义以及与哺乳动物的比较-

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Towako Kajiyama;Yoshihiro Yoshihara
通讯作者：
Yoshihiro Yoshihara

A comprehensive map of neuropeptide expressions in the adult zebrafish brain

成年斑马鱼大脑中神经肽表达的综合图谱

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Towako Hiraki-Kajiyama;Yoshihiro Yoshihara
通讯作者：
Yoshihiro Yoshihara

The Adult Zebrafish Brain Gene Expression Database

成年斑马鱼大脑基因表达数据库

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

An atlas and database of neuropeptide gene expression in the adult zebrafish forebrain

成年斑马鱼前脑神经肽基因表达图谱和数据库

DOI：
10.1101/2023.03.29.534505
发表时间：
2022
期刊：
bioRxiv
影响因子：
0
作者：
Towako Hiraki-Kajiyama;Nobuhiko Miyasaka;Reiko Ando;Noriko Wakisaka;Hiroya Itoga;Shuichi Onami;Yoshihiro Yoshihara
通讯作者：
Yoshihiro Yoshihara