新規癌遺伝子５ＭＰ１によるｎｏｎ－ＡＵＧ翻訳制御の生物学的役割に関する研究

新癌基因5MP1对非AUG翻译控制的生物学作用研究

基本信息

批准号：
18K19963
负责人：
浅野桂
金额：
$ 39.52万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Fund for the Promotion of Joint International Research (Home-Returning Researcher Development Research)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は課題１の5MPによる翻訳制御のゲノムワイドな効果を明らかにする手法であるribosome profilingの導入を、海外より専門家を招いて行った。広島大学の外国人特任助教招聘制度を活用し、コーネル大学のShu-bing Qian研究室よりXin Shu特任助教、コーク大学のParval Baranov研究室よりMartina Yordanova特任助教を招聘した。コロナ禍により入国が大幅に遅れたものの、夏休み期間中に来日し、薬剤処理を施した癌細胞や受精初期の卵細胞を用いたライブラリを作成し次世代塩基配列決定法によって翻訳が制御されるコード領域を同定した。課題３のアデノ随伴ウイルスの翻訳制御について、5MP1とRep78, Rep68, Rep40の相互作用をBLI法により解析した。Rep78に特異的に存在するC末端断片が5MP1との高い親和性に必要であること、この断片が関わる相互作用が5MP1の酸性表面に依存することを見出した。アデノ随伴ウイルスの「ポリシストロニック」mRNAであるVP2・VP3 mRNAの全てのシストロンのルシフェラーゼレポーターを作成し、ヒト細胞内でnon-AUG開始コドンからの翻訳をエンハンスするRNA領域を二つ同定した。遺伝子治療ベクターとして使用されるアデノ随伴ウイルスの産生量を増やすというゴールに向けて、この二つのエンハンサー領域の相互作用因子を同定する実験を計画中である。

今年，来自海外的专家邀请专家介绍核糖体分析，这种方法阐明了使用5MP（这是任务1）的翻译控制效果。使用广岛大学特别任命助理教授的邀请系统，Xin Shu受邀在Cornell University的Shu-Bing Qian Laboratory邀请Yorderan Yordanov Yordanov the parter the pare darive Yordanov the the the the Qian Qian实验室。尽管由于199年的大流行病，进入该国的进入大大延迟了，但他们在暑假期间来到日本，并在受精的早期使用药物处理的癌细胞和卵子细胞创建了一个图书馆，并确定了使用下一代测序方法控制翻译的编码区域。在任务3中与腺相关病毒的翻译控制中，通过BLI方法分析了5MP1和REP78，REP68和REP40之间的相互作用。我们发现，与5MP1的高亲和力需要在REP78中特异性存在的C末端片段，并且该片段中涉及的相互作用取决于5MP1的酸性表面。创建了与腺相关病毒的“多药” mRNA的所有cistron的荧光素酶报告，并在人类细胞中鉴定出了两个RNA区域，从而增强了非aug age Initiation Code子的翻译。为了增加用作基因疗法载体的腺相关病毒的产生，正在计划实验以识别这两个增强子区域之间的相互作用因子。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

University College Cork(アイルランド)

科克大学学院（爱尔兰）

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

コーネル大学医学部/NIAID, National Institutes of Health/ミシガン大学医学部(米国)

康奈尔大学医学院/NIAID、国立卫生研究院/密歇根大学医学院（美国）

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Human oncoprotein 5MP suppresses general and repeat-associated non-AUG translation via eIF3 by a common mechanism.

DOI：
10.1016/j.celrep.2021.109376
发表时间：
2021-07-13
期刊：
Cell reports
影响因子：
8.8
作者：
Singh CR;Glineburg MR;Moore C;Tani N;Jaiswal R;Zou Y;Aube E;Gillaspie S;Thornton M;Cecil A;Hilgers M;Takasu A;Asano I;Asano M;Escalante CR;Nakamura A;Todd PK;Asano K
通讯作者：
Asano K

Kansas State University/University of Michigan/Cornell University(米国)

堪萨斯州立大学/密歇根大学/康奈尔大学（美国）