Elucidation of molecular mechanisms of lymphopoiesis by essential minerals through TRPM7

通过 TRPM7 阐明必需矿物质淋巴细胞生成的分子机制

• 批准号: 21H02754
• 负责人: 大洞 將嗣
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02754/
• 关键词: リンパ球分化; ミネラル; イオンチャネル

本研究の目的は、必須ミネラルによる獲得免疫システム成立の新規分子基盤を明らかにすることである。本年度は以下の成果を得ることができた。1. 細胞死を回避することによってT細胞の分化が回復できるかどうかを検討するため、Trpm7(flox/flox) x Rag1-CreマウスとBcl2トランスジェニックマウスを交配したマウスを作成した。得られたマウスを解析した結果、Bcl2の強制発現によってDN3b細胞まで分化が進んだが、DN4細胞はほとんど認められなかった。一方で、CD4+細胞やDP（CD4+ CD8+）細胞が認められ、Bcl2の強制発現によって通常とは異なる分化をしている可能性が示唆された。また、胸腺細胞数は僅かに増加した。2. Trpm7(flox/flox) x Rag1-Creマウス個体やin vitroのT細胞分化培養系では、プロテオーム解析を行うための細胞数を得ることは困難であった。代替手段として、末梢リンパ組織でTRPM7欠損T細胞を得るために、Trpm7(flox/flox) x Cd4-Creマウスを作成した。このマウスでは、胸腺内のT細胞分化は正常であった一方、細胞数は若干減少するものの脾臓やリンパ節にT細胞が存在した。末梢T細胞をin vitroで抗CD3抗体と抗CD28抗体で共刺激した場合、細胞は芽球化するものの殆ど増殖しなかった。この表現型はTRPM7を欠損するDN3細胞に類似していた。3. DN3bで高発現するRNA結合分子XのKOマウスの胸腺T細胞と末梢T細胞の文化を解析したが共に正常であったため、この分子はT細胞分化に必須ではないことが明らかとなった。4. TRPM7によって制御される遺伝子のより正確な解析をするために、野生型とTrpm7(flox/flox) x Rag1-CreマウスのDN3a細胞を用いてRNA-seq解析を実施した。

这项研究的目的是阐明基本矿物质建立获得的免疫系统的新分子基础。今年，我们实现了以下结果：1。为了通过避免细胞死亡来研究T细胞分化，在将TRPM7（Flox/Flox）X RAG1-CRE小鼠与Bcl2转基因小鼠交叉的情况下创建了小鼠。分析了所得小鼠并通过强迫表达BCL2分析并区分了DN3B细胞，但几乎没有发现DN4细胞。另一方面，观察到CD4+细胞（CD4+ CD8+）细胞，表明BCl2强迫表达可能导致分化。此外，胸腺细胞的数量略有增加。 2。在TRPM7（Flox/Flox）X RAG1-CRE小鼠个体和体外T细胞分化培养物中，很难获得蛋白质组学分析的细胞数量。作为替代方案，创建了TRPM7（Flox/Flox）XCD4-CRE小鼠，以获得外周淋巴组织中缺乏TRPM7的T细胞。在这只小鼠中，胸腺中T细胞正常，但是T细胞存在于脾脏和淋巴结中，尽管细胞的数量略有减少。当外周T细胞与抗CD3和抗CD28抗体的体外抗体共同刺激时，细胞爆发性但很少增殖。该表型类似于缺乏TRPM7的DN3细胞。 3。我们分析了KO小鼠的胸腺T细胞和外周T细胞的培养物，这些胸膜T细胞在DN3B中高度表达，并且两者均正常，表明该分子对于T细胞分化不是必不可少的。 4。为了对由TRPM7调节的基因进行更准确的分析，使用野生型和TRPM7（Flox/Flox）XRAG1-CRE小鼠的DN3A细胞进行RNA-Seq分析。

项目成果

Orai2チャネルは炎症制刺激を受けたアストロサイトにおけるプロスタグランジンE2産生を制御する

Orai2 通道控制受到抗炎刺激的星形胶质细胞中前列腺素 E2 的产生

• 发表时间: 2022
• 作者: Mise S#;Matsumoto A#*;Shimada K;Hosaka T;Takahashi M;Ichihara K;Shimizu H;Shiraishi C;Saito D;Suyama M;Yasuda T;Ide T;Izumi Y;Bamba T;Kimura-Someya T;Shirouzu M;Miyata H;Ikawa M;Nakayama KI*.;中島弘貴，藤田沙也香，抱将史，永安一樹，大洞将嗣，白川久志，金子周司
• 通讯作者: 中島弘貴，藤田沙也香，抱将史，永安一樹，大洞将嗣，白川久志，金子周司

T細胞分化におけるイオンチャネルTRPM7の役割

离子通道TRPM7在T细胞分化中的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 大洞将嗣;横溝岳彦
• 通讯作者: 横溝岳彦

炎症性刺激を受けたアストロサイトにおけるOrai2チャネルの機能解明

阐明星形胶质细胞中 Orai2 通道在炎症刺激下的功能

• 发表时间: 2022
• 作者: 長尾 有佳里;横井 暁;吉田 康将;渡邉 絵里;吉原 雅人;玉内 学志;芳川 修久;山本 雄介;加藤 友康;梶山 広明;中島弘貴，藤田沙也香，抱将史，永安一樹，大洞将嗣，白川久志，金子周司
• 通讯作者: 中島弘貴，藤田沙也香，抱将史，永安一樹，大洞将嗣，白川久志，金子周司

A critical role of transient receptor melastatin 7 in early T cell development

瞬时受体 melastatin 7 在早期 T 细胞发育中的关键作用

• 发表时间: 2021
• 作者: Oh-hora M;Yokomizo T
• 通讯作者: Yokomizo T

Selective suppression of IL-10 transcription by calcineurin in dendritic cells through inactivation of CREB

树突状细胞中钙调磷酸酶通过 CREB ​​失活选择性抑制 IL-10 转录

• DOI: 10.1093/intimm/dxab112
• 发表时间: 2021
• 期刊: International Immunology
• 影响因子: 4.4
• 作者: Lu Xiuyuan;Oh-hora Masatsugu;Takeda Kiyoshi;Yamasaki Sho
• 通讯作者: Yamasaki Sho