新規複合がん免疫療法の開発を指向した創薬基盤研究

旨在开发新的组合癌症免疫疗法的基础药物发现研究

• 批准号: 21H02609
• 负责人: 浅井 章良
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02609/
• 关键词: がん免疫療法; 免疫チェックポイント; スクリーニング; ドラッグデザイン; PD-L1; ドッキングシミュレーション; ハイブリッド化合物

本研究課題では、低分子をベースとした複合がん免疫療法のための堅牢な創薬基盤を築くことを目的としている。FCM法を基盤とした免疫チェックポイント分子結合アッセイパネルの構築については、FCMをベースとしたアッセイ法により、PD-1/PD-L1、PD-1/PD-L2、CTLA-4/B7、LAG-3/MHC II、BTLA/HVEM、TIGIT/CD155、TIM-3/PtdSerの結合アッセイ法を確立した。またPD-1/PD-L1相互作用については、PD-L1をリガンドとしたアッセイ法に加えて、異なる細胞株を用いてPD-1をリガンドとするアッセイ法も併せて構築した。TIGIT/CD155相互作用ついても同様に両アッセイを構築した。現在各アッセイ系による阻害化合物スクリーニングを実施中であり複数のヒット化合物を得ている。またTIGIT/CD155相互作用については、複合体Ｘ線結晶構造解析からTIGITのチロシンとの結合に重要なCD155の疎水性ポケットを特定しバーチャルスクリーニングによる化合物の絞込みを実施した。さらに既に合成法を確立しているPD-L1リガンドの評価を行い、nMオーダーの強力かつ特異的なPD-L1阻害活性を有することを明らかとした。本化合物については、PD-L1遺伝子とTCR activator 遺伝子を一過性に導入したHEK293細胞とJurkat/NFAT-RE/PD-1細胞の共培養下でルシフェラーゼレポーター活性を測定することによって化合物の免疫抑制解除機能を検証した。また細胞障害性化合物とのハイブリッド化合物の一部について合成を完了した。さらに研究代表者らが創製したIDO1/TDO二重阻害化合物やSTAT3阻害化合物についても細胞系と動物モデルでの免疫学的解析を進め、いずれも新規ハイブリッド化合物創製のためのリガンドとして有望であることを検証した。

该研究主题旨在为基于小分子的组合癌症免疫疗法建立强大的药物发现基金会。为了基于FCM方法构建免疫检查点分子结合测定面板，用于PD-1/PD-L1，PD-1/PD-L2，CTLA-4/B7，LAG-3/MHC II，BTLA/HVEM，TIGIT/CDIGIT/CD155，以及TIM-3/PTSER的结合测定。此外，除了使用PD-L1作为配体的测定外，还使用不同的细胞系构建了使用PD-1作为配体的测定。两种测定法都是针对Tigit/CD155相互作用构建的。当前，使用各种测定系统筛选抑制化合物，并获得多种命中化合物。关于TIGIT/CD155相互作用，通过复杂的X射线晶体结构分析鉴定出CD155的疏水袋，对于将Tigit与酪氨酸结合至关重要，并且通过虚拟筛选将化合物缩小。此外，对已经建立的PD-L1配体进行了评估，以揭示它们在NM顺序中具有有效的特定PD-L1抑制活性。对于这种化合物，通过测量与PD-L1基因和TCR激活剂基因和Jurkat/NFAT-RE/PD-1细胞在HEK293细胞的共培养中测量荧光素酶报道的活性来验证该化合物的免疫抑制功能。此外，完成了某些杂化化合物与细胞毒性化合物的合成。此外，在细胞系和动物模型中对IDO1/TDO双重抑制性化合物和STAT3抑制化合物的免疫学分析是在细胞系和动物模型中进行的，并证实它们都是创造新型混合化合物的有希望的配体。

项目成果

TIGIT-CD155結合阻害化合物スクリーニング系の構築

TIGIT-CD155结合抑制化合物筛选体系的构建

• 发表时间: 2022
• 作者: 永岡菜;村上央;小郷尚久;浅井章良
• 通讯作者: 浅井章良

STAT3 inhibition suppresses adaptive survival of ALK-rearranged lung cancer cells through transcriptional modulation of apoptosis.

• DOI: 10.1038/s41698-022-00254-y
• 发表时间: 2022-02-28
• 期刊: NPJ precision oncology
• 影响因子: 7.9
• 作者: Yanagimura N;Takeuchi S;Fukuda K;Arai S;Tanimoto A;Nishiyama A;Ogo N;Takahashi H;Asai A;Watanabe S;Kikuchi T;Yano S
• 通讯作者: Yano S

The compound activating mitochondrial respiration leads PD-1 blockade efficacy even in a low immunogenic tumor

即使在低免疫原性肿瘤中，激活线粒体呼吸的化合物也能发挥 PD-1 阻断功效

• 发表时间: 2021
• 作者: Yosuke Dotsu;Daisuke Muraoka;Naohisa Ogo;Yudai Sonoda;Hideo Yagita;Hiroshi Mukae;Hiroaki Ikeda
• 通讯作者: Hiroaki Ikeda

Discovery of novel cysteine derivatives to improve selectivity and targeting to cancer cells using in silico modeling

发现新型半胱氨酸衍生物，以提高计算机模拟中对癌细胞的选择性和靶向性

• 发表时间: 2021
• 作者: Naohisa Ogo;Hisashi Murakami;Akira Asai
• 通讯作者: Akira Asai

Novel STAT3 inhibitor, YHO-1701 enhances the antitumor effect of anti-PD-1 antibody

新型STAT3抑制剂YHO-1701增强抗PD-1抗体的抗肿瘤作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Hiroyuki Takahashi;Hisashi Murakami;Naohisa Ogo;Daisuke Muraoka;Akimitsu Takagi;Akira Asai
• 通讯作者: Akira Asai