Immunotoxicity evaluation by assessing the effects on susceptibility to infectious disease using a fish model

通过使用鱼类模型评估对传染病易感性的影响来评估免疫毒性

基本信息

批准号：
20K12183
负责人：
仲山慶
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

体重約5 gのコイにA. salmonicidaを浸漬感染し，1週間後に外観症状を確認した上で，頭腎，体腎，肝膵臓をそれぞれ採取した。感染区（n = 4）と対照区（n = 3）ともに雄から採取した各臓器をRNA-seqに供し，得られたシーケンス結果に基づいて遺伝子発現解析を実施した。また，体腎への影響を評価するために，体重約7 gのコイにA. salmonicidaを感染し，感染3日後および7日後に左右の体腎を摘出し，片方を病理組織学的観察に，もう片方をA. salmonicidaの検出に用いた。発症した個体においては，頭腎が肥大し，体腎に重篤な損傷が視認できた。RNA-seqの結果，頭腎，体腎，肝膵臓の各臓器からそれぞれ51626，55471，38780の転写産物の発現が検出され，そのうち1241，965，1393の発現量が有意に変動していた。発現量が減少した遺伝子を対象に遺伝子オントロジー（GO）解析を行ったところ，鉄イオンの恒常性維持（GO:0055072）をはじめとした最も多くのGO termが体腎で検出された。体腎の病理組織学的観察から，造血組織の壊死および炎症性細胞の浸潤，尿細管上皮細胞の混濁や壊死など明確な病変が確認され，GO解析の結果と矛盾しなかった。また，感染個体の体腎にA. salmonicidaが存在することが疑われた。以上の結果から，A. salmonicidaはコイの体腎の機能低下させることが予想され，腎機能の評価により発症の確認が可能であることが示唆された。

将重约5g的鲤鱼用杀鲑鱼浸泡感染，1周后确认外部症状，采集头肾、体肾、肝胰腺。从感染组（n = 4）和对照组（n = 3）的男性中收集的器官进行RNA-seq，并根据获得的序列结果进行基因表达分析。此外，为了评估对身体肾脏的影响，我们用杀鲑鱼感染了重约7克的鲤鱼，在感染后3天和7天取出左右身体肾脏，并对一侧进行组织病理学观察。另一种用于检测杀鲑鱼。在受影响的个体中，头部和肾脏增大，身体和肾脏受到严重损害。 RNA-seq的结果显示，在头肾、体肾和肝胰腺器官中分别检测到51,626个、55,471个和38,780个转录本的表达，其中，1,241个、965个和1,393个转录本的表达水平发生了显着变化。当对表达水平下降的基因进行基因本体（GO）分析时，在体内肾脏中检测到了最多的GO术语，包括铁离子稳态维持（GO：0055072）。肾脏组织病理学观察显示造血组织坏死、炎性细胞浸润、肾小管上皮细胞混浊坏死等明显病变，与GO分析结果一致。人们还怀疑感染者的身体和肾脏中存在杀鲑鱼。从以上结果可以预测，杀鲑鱼会降低鲤鱼体内肾脏的功能，并提出可以通过评估肾功能来确认疾病的发作。