薬剤性歯肉増殖症への補完代替療法：ルテインによるTRPA1チャネルの阻害効果

药物性牙龈增生的补充和替代疗法：叶黄素对TRPA1通道的抑制作用

基本信息

批准号：
20K10279
负责人：
島津貴咲
金额：
$ 2.75万
依托单位：
The Nippon Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、ルテインによるフェニトイン性歯肉増殖症の緩和メカニズムの解明を目的として、歯肉組織構成細胞や基質の運命決定機構に着目し、病理組織学的に形態解析した。所定の観察期間の後、上顎試料を摘出し固定液に浸漬させた。その後、実体顕微鏡にて観察し、脱灰パラフィン包埋、第一臼歯の矢状断薄切標本を作製した。切片は、HE染色、マッソントリクローム(MT)染色、免疫蛍光二重染色（TRPA1抗体、S100A4抗体、MMP-1抗体、PCNA抗体）を施した。上顎第一臼歯の頬側歯肉幅を計測した結果、対照群と比較してPHT投与群の歯肉が有意に肥大し、PHT＋LUT投与群の歯肉肥大が有意に軽減していた。HE染色像の観察では、PHT投与群の歯肉が歯槽頂付近まで延伸しており、エオジンに染まる好酸性基質沈着がみられた。また、PHT＋LUT投与群で同様の延伸がみられたが、その程度は軽微であり、基質沈着は対照群と同程度であった。MT染色像では、歯肉中において青色に濃染する膠原線維の面積が、対照群と比較してPHT投与群の面積が有意に増加し、PHT投与群と比較してPHT＋LUT投与群の面積が有意に減少していた。また、TRPA1抗体とS100A4抗体の免疫二重染色では、各群で歯肉結合組織中にTRPA1を発現する歯肉線維芽細胞が確認された。MMP-1 抗体の免疫染色を施した結果、各群における陽性細胞数に有意な差はなかった。細胞増殖活性を観察するためにPCNA 抗体を用いた免疫蛍光染色を施した結果、各群における上皮、結合組織ともに陽性細胞数に有意差はなかった。以上のことから、PHT性歯肉増殖症の発症にTRPA1が関与し、歯肉肥大の病態としてPHT投与による膠原線維の増生促進が起因することが示唆された。また、ルテインがTRPA1チャネル阻害剤として機能することで、PHT性歯肉増殖症の症状緩和に有効であることが示された。

今年，为了阐明叶黄素缓解苯妥英诱导的牙龈增生的机制，我们重点关注牙龈组织构成细胞和基质的命运决定机制，并进行组织病理学形态学分析。经过预定的观察时间后，取出上颌样本并浸入固定剂中。此后，使用立体显微镜观察牙齿，脱矿，石蜡包埋，并制备第一磨牙的矢状切片。对切片进行HE染色、马森三色(MT)染色和双重免疫荧光染色(TRPA1抗体、S100A4抗体、MMP-1抗体、PCNA抗体)。测量上颌第一磨牙颊侧牙龈宽度显示，与对照组相比，PHT治疗组的牙龈明显增大，而PHT+LUT治疗组的牙龈肥大程度明显减轻。 HE染色图像观察显示，PHT治疗组牙龈延伸至牙槽嵴附近，可见伊红染色的嗜酸性基质沉积物。此外，在PHT+LUT给药组中观察到类似的拉伸，但程度轻微，并且基质沉积处于与对照组相同的水平。 MT染色图像中，与对照组相比，PHT治疗组牙龈中深染蓝色的胶原纤维面积显着增加，且PHT+LUT治疗组的面积显着增加。与 PHT 治疗组相比有所增加。此外，TRPA1和S100A4抗体双重免疫染色证实各组牙龈结缔组织中有表达TRPA1的牙龈成纤维细胞。 MMP-1抗体免疫染色结果，各组阳性细胞数无显着差异。采用PCNA抗体免疫荧光染色观察细胞增殖活性，结果各组上皮及结缔组织中阳性细胞数无显着差异。上述结果提示TRPA1参与了PHT诱导的牙龈增生的发生，牙龈肥大的发病机制是由于PHT促进胶原纤维增殖所致。此外，叶黄素作为 TRPA1 通道抑制剂，可有效缓解 PHT 引起的牙龈增生症状。