Elucidation of the effect of basic fibroblast growth factor to prevent bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaws

阐明碱性成纤维细胞生长因子预防双膦酸盐相关颌骨坏死的作用

基本信息

批准号：
20K18734
负责人：
今田光彦
金额：
$ 2.16万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

BRONJ発症モデルに対し抜歯窩内にβ-TCPを填入した研究について、一昨年に行った実験では抜歯後1週でβ‐TCPと周囲肉芽組織を摘出しLC-MS/MS分析でゾレドロン酸(ZA)濃度を検証したところ、β‐TCPからは本来検出しないZAを検出し、またβ‐TCPを填入しない群と比較すると肉芽組織中のZA濃度の減少を認めた。今年度は両群の肉芽組織からプロテオーム解析を行い関連タンパク質の検討を行った。すると有意差のあったタンパクのうち非特異的な上皮/筋組織関連を除外すると、Atg9a、LC-3、Rubiconといったオートファジーに関連するタンパク質の発現に大きな変動を認めた。そこでAtg9a、LC-3、Rubiconの他、創傷治癒のマーカーとなるCD68、α-SMA、Ki-67の免疫組織化学染色を行い、高倍率視野を各4視野をランダムに抽出し、発現状況を比較した。結果、Atg9a、LC-3は、上皮細胞での発現は認めず、上皮下の単核炎症性細胞(MIC) において、β-TCP填入群で発現増強していた。 Rubiconは、上皮細胞においてβ-TCP填入群で発現抑制を認めた。MICでは両群で有意差は認めなかった。Ki-67は、上皮細胞では両群で有意差は認めなかったが、MICではβ-TCP填入群で陽性率が増加していた。なおCD68、α-SMAでは有意差は認めなかった。以上から遊離BPが減少しているβ-TCP填入群でATGに必須の因子が発現増強、遊離BPが増加しているβ-TCP非填入群でATG抑制因子が発現増強していることから、歯槽骨から遊離したBPは、抜歯窩局所のATG活性を抑制する可能性が示された。

关于在Bronj发作模型中填充β-TCP的研究，β-TCP和周围颗粒组织在拔牙后的一周内被去除，并在验证后分析了LC-MS/MS分析ZA）浓度，β -TCP检测到最初未检测到的ZA，并且与未填充β -TCP的组相比，观察到颗粒组织中的ZA浓度。今年，从两组的颗粒组织中进行了蛋白欧姆分析，以考虑相关的蛋白质。除了显着蛋白质中与非特异性上皮/肌肉组织相关外，在与自噬相关的蛋白质表达中，例如ATG9A，LC-3和Rubicon都会显着波动。因此，除了ATG9A，LC-3，Rubicon，CD68，α-SMA和KI-67的免疫化学化学染色（是伤口愈合的标志）外，随机提取四个高磁化视野并随机提取每个场我比较了。结果，在上皮细胞中不允许ATG9A和LC-3表达，并且在β-TCP填充组中的皮下单核炎症细胞（MIC）中扩展和增强。发现Rubicon抑制了β-TCP填充组的上皮细胞中的表达。在MIC中，两组没有显着差异。 KI-67并未认识到上皮细胞中两组之间存在显着差异，但是β-TCP填充组MIC的正率增加。 CD68和α-SMA之间没有显着差异。从上面，降低的β-TCP填充基团的数量增强了ATG所需的表达，并增加了自由BPS的数量，并且β-TCP非载荷组的表达增加了从肺泡骨播放的BP可以抑制发光窝区域的ATG活性。