Elucidation of the effect of basic fibroblast growth factor to prevent bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaws

阐明碱性成纤维细胞生长因子预防双膦酸盐相关颌骨坏死的作用

基本信息

批准号：
20K18734
负责人：
今田光彦
金额：
$ 2.16万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

BRONJ発症モデルに対し抜歯窩内にβ-TCPを填入した研究について、一昨年に行った実験では抜歯後1週でβ‐TCPと周囲肉芽組織を摘出しLC-MS/MS分析でゾレドロン酸(ZA)濃度を検証したところ、β‐TCPからは本来検出しないZAを検出し、またβ‐TCPを填入しない群と比較すると肉芽組織中のZA濃度の減少を認めた。今年度は両群の肉芽組織からプロテオーム解析を行い関連タンパク質の検討を行った。すると有意差のあったタンパクのうち非特異的な上皮/筋組織関連を除外すると、Atg9a、LC-3、Rubiconといったオートファジーに関連するタンパク質の発現に大きな変動を認めた。そこでAtg9a、LC-3、Rubiconの他、創傷治癒のマーカーとなるCD68、α-SMA、Ki-67の免疫組織化学染色を行い、高倍率視野を各4視野をランダムに抽出し、発現状況を比較した。結果、Atg9a、LC-3は、上皮細胞での発現は認めず、上皮下の単核炎症性細胞(MIC) において、β-TCP填入群で発現増強していた。 Rubiconは、上皮細胞においてβ-TCP填入群で発現抑制を認めた。MICでは両群で有意差は認めなかった。Ki-67は、上皮細胞では両群で有意差は認めなかったが、MICではβ-TCP填入群で陽性率が増加していた。なおCD68、α-SMAでは有意差は認めなかった。以上から遊離BPが減少しているβ-TCP填入群でATGに必須の因子が発現増強、遊離BPが増加しているβ-TCP非填入群でATG抑制因子が発現増強していることから、歯槽骨から遊離したBPは、抜歯窩局所のATG活性を抑制する可能性が示された。

在一项研究中，在两年前进行的实验中，将β-TCP插入提取插座中的提取插座，在提取后一周进行了β-TCP和周围的颗粒组织，并通过LC-MS/MS/MS分析验证了Zoledronic Acid（ZA）浓度。从β-TCP检测到ZA，与未填充β-TCP的组相比，观察到颗粒组织中ZA浓度的降低。今年，检查了两组和相关蛋白质的肉芽组织进行蛋白质组分析。当从显着不同的蛋白质中排除非特异性上皮/肌肉组织关联时，观察到自噬相关蛋白（例如ATG9A，LC-3）的表达显着变化。因此，除了ATG9A，LC-3和Rubicon外，我们还对CD68，α-SMA和KI-67进行免疫组织化学染色，它们是伤口愈合的标志物，并将高磁化视野的四个领域随机提取，并比较了表达状态。结果，在上皮细胞中未观察到ATG9A或LC-3的表达，并且在上皮层以下的单核炎性细胞（MIC）的β-TCP填充组中得到了增强。 rubicon在上皮细胞中表现出β-TCP填充组的表达抑制。两组在MIC中没有显着差异。尽管两组在上皮细胞中没有显着差异，但β-TCP载荷组MIC的KI-67正速率增加。但是，CD68和α-SMA之间未观察到显着差异。从上面的角度来看，在β-TCP填充的基团中，自由BP的表达增加了，并且在β-β-TCP填充的组中增加了ATG抑制子的表达，其中自由BP的增加增加，表明从肺泡骨骼中释放出的BP可以局部抑制ATG在提取位点局部抑制ATG活性。