HPV関連中咽頭癌におけるDNA損傷修復系と内因性免疫因子APOBEC3の発現

DNA损伤修复系统和内源性免疫因子APOBEC3在HPV相关口咽癌中的表达

• 批准号: 20K18299
• 负责人: 甲能 武幸
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Keio University (2021-2022)独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター) (2020)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18299/
• 关键词: HPV; 頭頸部癌; DNA損傷修復系; APOBEC; 阻害実験; 中咽頭癌; 化学療法; 予後予測因子; shRNA

HPV陽性頭頸部癌に対し、DNA損傷修復系因子およびAPOBEC因子が新規治療の標的となりうるか、in vitroでの解析を行った。具体的には、様々なDNA損傷修復経路のうちDNA2本鎖損傷を修復するATM経路、1本鎖損傷や複製フォークの停止を修復するATR経路、DNA2本鎖架橋を修復するFA経路に着目し、HPV陽性頭頸部癌細胞株であるUPCI090細胞と、コントロールとしてHPV陰性頭頸部癌細胞株であるSCC9細胞、SCC25細胞を用いて阻害実験を行った。阻害にはKU55933(ATM 阻害剤)とVE822(ATR 阻害剤)を用いたが、FA経路とAPOBEC因子の特異的阻害薬は今のところ存在しないので、RNA干渉によりノックダウン細胞を作成し検討した。その結果、HPV陽性頭頸部癌細胞株においては、シスプラチン単剤投与と比べ、DNA損傷修復経路阻害＋シスプラチン投与で著明に抗腫瘍効果を認めた。なかでも、ATR阻害剤併用投与群で最も顕著に殺細胞効果を認めた。APOBEC３Bのノックダウン細胞におけるシスプラチンの抗腫瘍効果はWild typeと比較してわずかに増大していたが、統計学的な有意な差は認めず、APOBEC因子阻害での抗腫瘍効果の上乗せは軽度であった。一方、HPV陰性頭頸部癌細胞株においてはDNA損傷修復経路阻害の抗腫瘍上乗せ効果は軽度であった。HPV増殖や腫瘍化への関与が示唆されるDNA損傷修復系因子の阻害はHPV陽性頭頸部癌においてより効果を発揮し、ATR阻害剤併用によって殺細胞性のシスプラチンを低用量で投与する新たな治療戦略への寄与が考察された。

对于HPV阳性宫颈癌，我们在体外分析了DNA损伤修复系统和APOBEC因子是否可以针对新治疗。具体而言，集中于恢复各种DNA损坏途径之间的DNA2链损伤的ATM路线，恢复一个链损伤的ATR路线和复制叉的悬架以及恢复DNA2绞合的FA路线 - 阳性宫颈癌细胞，UPCI090细胞和使用SCC9细胞，SCC25细胞的抑制实验，这些细胞是HPV阴性颈部癌细胞作为对照。 KU55933（ATM抑制剂）和VE822（ATR抑制剂）用于抑制作用，但没有特定的FA路线抑制剂和APOBEC因子，因此我们通过RNA干扰创建并检查了敲击细胞。结果，在HPV阳性颈部癌细胞中，与单独的顺铂施用相比，DNA损伤恢复途径抑制 +顺铂给药可极大地识别抗微生物效应。最重要的是，认识到ATR抑制剂组合组的最明显的细胞效应。与野生型相比，apobec3b在敲除细胞中的抗肿瘤效应略有增加，但尚未确认统计的显着差异，并且在Apobec因子抑制中增加了抗肿瘤效应。另一方面，在HPV负头宫颈癌细胞库存中，将抗肿瘤施加在DNA损伤恢复途径中的影响很小。在HPV增殖和肿瘤中提出的DNA损伤修复术在HPV阳性宫颈癌中更有效，并考虑使用ATR抑制剂来施用低剂量的切尔普蛋白。

项目成果

Activation of DNA damage repair factors in HPV positive oropharyngeal cancers

• DOI: 10.1016/j.virol.2020.05.003
• 发表时间: 2020-08-01
• 期刊: VIROLOGY
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kono, Takeyuki;Hoover, Paul;Laimins, Laimonis A.
• 通讯作者: Laimins, Laimonis A.

HPV関連中咽頭癌におけるDNA損傷修復系因子の活性化と予後に関する検討

HPV相关口咽癌DNA损伤修复系统因子激活及预后研究

• 发表时间: 2021
• 作者: 角田 篤信;陶 美梨;園田 健二;芳川 瑛久;荒井 慎平;甲能武幸
• 通讯作者: 甲能武幸