HPV関連中咽頭癌におけるDNA損傷修復系と内因性免疫因子APOBEC3の発現

DNA损伤修复系统和内源性免疫因子APOBEC3在HPV相关口咽癌中的表达

• 批准号: 20K18299
• 负责人: 甲能 武幸
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Keio University (2021-2022)独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター) (2020)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18299/
• 关键词: HPV; 頭頸部癌; DNA損傷修復系; APOBEC; 阻害実験; 中咽頭癌; 化学療法; 予後予測因子; shRNA

HPV陽性頭頸部癌に対し、DNA損傷修復系因子およびAPOBEC因子が新規治療の標的となりうるか、in vitroでの解析を行った。具体的には、様々なDNA損傷修復経路のうちDNA2本鎖損傷を修復するATM経路、1本鎖損傷や複製フォークの停止を修復するATR経路、DNA2本鎖架橋を修復するFA経路に着目し、HPV陽性頭頸部癌細胞株であるUPCI090細胞と、コントロールとしてHPV陰性頭頸部癌細胞株であるSCC9細胞、SCC25細胞を用いて阻害実験を行った。阻害にはKU55933(ATM 阻害剤)とVE822(ATR 阻害剤)を用いたが、FA経路とAPOBEC因子の特異的阻害薬は今のところ存在しないので、RNA干渉によりノックダウン細胞を作成し検討した。その結果、HPV陽性頭頸部癌細胞株においては、シスプラチン単剤投与と比べ、DNA損傷修復経路阻害＋シスプラチン投与で著明に抗腫瘍効果を認めた。なかでも、ATR阻害剤併用投与群で最も顕著に殺細胞効果を認めた。APOBEC３Bのノックダウン細胞におけるシスプラチンの抗腫瘍効果はWild typeと比較してわずかに増大していたが、統計学的な有意な差は認めず、APOBEC因子阻害での抗腫瘍効果の上乗せは軽度であった。一方、HPV陰性頭頸部癌細胞株においてはDNA損傷修復経路阻害の抗腫瘍上乗せ効果は軽度であった。HPV増殖や腫瘍化への関与が示唆されるDNA損傷修復系因子の阻害はHPV陽性頭頸部癌においてより効果を発揮し、ATR阻害剤併用によって殺細胞性のシスプラチンを低用量で投与する新たな治療戦略への寄与が考察された。

进行了体外分析，以确定是否可以将DNA损伤修复和APOBEC因子用于HPV阳性头颈癌的新型治疗方法。 Specifically, among the various DNA damage repair pathways, we focused on the ATM pathway that repairs double-stranded DNA damage, the ATR pathway that repairs single-stranded damage and replication fork arrest, and the FA pathway that repairs double-stranded DNA crosslinks, and inhibition experiments were performed using UPCI090 cells, an HPV-positive head and neck cancer cell line, and SCC9 and SCC25作为对照的细胞，是HPV阴性头和颈癌细胞系。使用KU55933（ATM抑制剂）和VE822（ATR抑制剂）进行抑制，但是由于不存在FA途径的特定抑制剂，并且不存在APOBEC因子，因此通过RNA干扰创建并研究了敲低细胞。结果，在HPV阳性的头颈癌细胞系中，与单独的顺铂相比，DNA损伤修复途径和顺铂给药的抑制作用显示出明显的抗肿瘤作用。其中，在接受ATR抑制剂组合的组中，最著名的杀伤作用是尤其是观察到的。与野生型相比，顺铂在APOBEC3B的敲除细胞中的抗肿瘤作用略有增加，但没有统计学上的显着差异，并且抗肿瘤对APOBEC因子抑制的效果较小。另一方面，在HPV阴性头和颈部癌细胞系中，抑制DNA损伤修复途径的抗肿瘤 - 附加效应是温和的。抑制DNA损伤修复因子，表明参与HPV增殖和肿瘤烯在HPV阳性的头颈癌中更有效，并且考虑使用使用ATR抑制剂对新的治疗策略的贡献。

项目成果

Activation of DNA damage repair factors in HPV positive oropharyngeal cancers

• DOI: 10.1016/j.virol.2020.05.003
• 发表时间: 2020-08-01
• 期刊: VIROLOGY
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kono, Takeyuki;Hoover, Paul;Laimins, Laimonis A.
• 通讯作者: Laimins, Laimonis A.

HPV関連中咽頭癌におけるDNA損傷修復系因子の活性化と予後に関する検討

HPV相关口咽癌DNA损伤修复系统因子激活及预后研究

• 发表时间: 2021
• 作者: 角田 篤信;陶 美梨;園田 健二;芳川 瑛久;荒井 慎平;甲能武幸
• 通讯作者: 甲能武幸