がん幹細胞発生でのAktシグナル経路によるエピゲノム制御と代謝制御の解明

阐明 Akt 信号通路在癌症干细胞发育中的表观基因组和代谢控制

基本信息

批准号：
20K07577
负责人：
関田洋一
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

神経膠芽腫は、がん幹細胞状態と非がん幹細胞状態を双方向に遷移する、state transitionを起こすことが報告されている。幹細胞状態の表面マーカーとして、CD133が広く使用されており、本研究で使用している神経膠芽腫由来培養細胞のCD133陽性率は、株によって違いはあるものの、0~80%であることを確認している。一方、CD133陽性細胞と陰性細胞での遺伝子発現の違いを調べたところ、神経幹細胞から分化してくる細胞種の分化マーカーの発現に顕著な違いは見られなかった。一方、通常は無血清培地で浮遊培養している神経膠芽腫細胞を、血清培地にて接着培養した場合には、さまざまな分化マーカーの発現が大きく変動することを見出した。つまり、接着培養下では、がん幹細胞性が低下し、悪性度も低下していることが示唆された。このことから、我々は、無血清培地での浮遊培養条件で存在する神経膠芽腫幹細胞は、CD133を発現している状態と発現していない状態を行き来している（CD133陰性であっても、この培養条件では幹細胞性を維持している）、つまり神経膠芽腫幹細胞ではCD133が点滅するように発現したりしなかったりしているものと予想している。また、本研究では、CD133の発現を可視化することを目的として、CD133をコードするPROM1遺伝子の発現制御領域（プロモーターとエンハンサー）の下流で蛍光タンパク質遺伝子（GFPまたはDsRed）を発現するレンチウィルスベクターを構築し、これを浮遊培養下の神経膠芽腫細胞に遺伝子導入する系を検討した。

据报道，胶质母细胞瘤经历癌症干细胞状态和非癌症干细胞状态之间的双向状态转变。 CD133被广泛用作干细胞状态的表面标记，本研究中使用的胶质母细胞瘤来源的培养细胞的CD133阳性率因菌株而异，但我估计为0-80%。证实了这一点。另一方面，当我们检查CD133阳性和阴性细胞之间基因表达的差异时，我们发现从神经干细胞分化的细胞类型的分化标记物的表达没有显着差异。另一方面，我们发现，通常在无血清培养基中悬浮培养的胶质母细胞瘤细胞在血清培养基中贴壁培养时，各种分化标志物的表达变化很大。换句话说，有人认为在贴壁培养下，癌症干细胞和恶性肿瘤会减少。基于此，我们发现存在于无血清培养基中的悬浮培养条件下的胶质母细胞瘤干细胞在表达CD133和不表达CD133（即使它们是CD133阴性）之间来回变化，在这些培养条件下，它们保持其干性。），这意味着 CD133 预计在胶质母细胞瘤干细胞中以闪烁模式表达或缺失。此外，在本研究中，为了可视化CD133的表达，我们使用了慢病毒载体，该慢病毒载体在编码CD133的PROM1基因的表达控制区（启动子和增强子）下游表达荧光蛋白基因（GFP或DsRed）我们构建了一个系统，将该基因导入悬浮培养的胶质母细胞瘤细胞中。

项目成果

期刊论文数量（26）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

AKT signaling is associated with epigenetic reprogramming via the upregulation of TET and its cofactor, alpha-ketoglutarate during iPSC generation

AKT 信号传导通过 iPSC 生成过程中 TET 及其辅助因子 α-酮戊二酸的上调与表观遗传重编程相关

DOI：
10.1186/s13287-021-02578-1
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sekita Y; Sugiura Y; Matsumoto A; Kawasaki Y; Akasaka K; Konno R; Shimizu M; Ito T; Sugiyama E; Yamazaki T; Kanai E; Nakamura T; Suematsu M; Ishino F; Kodera Y; Kohda T; Kimura T.
通讯作者：
Kimura T.

Epigenome editing reveals core DNA methylation for imprinting control in the Dlk1-Dio3 imprinted domain.

表观基因组编辑揭示了 Dlk1-Dio3 印迹域中印迹控制的核心 DNA 甲基化。

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yoichi Sekita; Shin Kojima; Naoya Shiochi; Tohru Kimura
通讯作者：
Tohru Kimura

Mechanism of promotion of cell reprogramming by AKT signal

AKT信号促进细胞重编程的机制

DOI：
10.14952/seikagaku.2023.950066
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
関田洋一;木村透
通讯作者：
木村透

SWI/SNF chromatin remodeling complex is required for initiation of sex-dependent differentiation in mouse germline

SWI/SNF 染色质重塑复合物是启动小鼠种系性别依赖性分化所必需的

DOI：
10.1038/s41598-021-03538-8
发表时间：
2021-12-15
期刊：
影响因子：
4.6
作者：
Ito T;Osada A;Ohta M;Yokota K;Nishiyama A;Niikura Y;Tamura T;Sekita Y;Kimura T
通讯作者：
Kimura T

Switching defective/sucrose non‐fermenting chromatin remodeling complex coordinates meiotic gene activation via promoter remodeling and Meiosin activation in female germline

切换缺陷/蔗糖非发酵染色质重塑复合物通过启动子重塑和减数分裂蛋白激活协调雌性种系减数分裂基因激活

DOI：
10.1111/gtc.12990
发表时间：
2022-11-12
期刊：
Genes to Cells
影响因子：
2.1
作者：
Toshiaki Ito;M. Ohta;Atsuki Osada;A. Nishiyama;K. Ishiguro;T. Tamura;Y. Sekita;Tohru Kimura
通讯作者：
Tohru Kimura