線虫を用いたCNOT2遺伝子の正常神経発生における役割解明

使用线虫阐明 CNOT2 基因在正常神经发生中的作用

基本信息

批准号：
20K16866
负责人：
上原朋子
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Institute for Developmental Research Aichi Developmental Disability Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、新規の知的障害症候群の原因であるCNOT2遺伝子の機能不全により生じる病態について解明し、CNOT2 の正常神経発生における役割の解明を目指している。複雑な神経回路を有するヒトで、その詳細を研究することは極めて困難である。そのため、ヒトの神経発生等の研究に適しているモデル生物である C.elegans を用いて研究を行う予定であった。C.elegansにおけるCNOT2ホモログであるntl-2遺伝子の発現パターンを調べて組織ごとのプロモーターを同定し、組織特異的にntl-2遺伝子発現を欠失させたモデル生物を作製する方針であった。しかしながら複数回実験したが、ntl-2遺伝子の組織毎のプロモーターの同定は困難であった。そのため方針変更せざるを得ず、今後は培養細胞を用いて解析を行うこととした。培養神経細胞に患者と同様の変異を有するCNOT2遺伝子を導入し、表現型を確認して野生型CNOT2を導入した場合との差を比較する方針とした。結果をもとに神経回路におけるCNOT2の機能について検討する。また、患者と同じ変異を持つ、あるいはCNOT2欠失を有するモデルマウスを作製して表現型を解析することも予定している。

在这项研究中，我们的目的是阐明 CNOT2 基因功能障碍引起的病理学，这是一种新的智力障碍综合征的原因，并阐明 CNOT2 在正常神经发生中的作用。人类拥有复杂的神经回路，研究其细节极其困难。因此，我们计划利用线虫进行研究，线虫是一种适合人类神经发生研究的模式生物。该计划是研究秀丽隐杆线虫中 CNOT2 同源物 ntl-2 基因的表达模式，鉴定每个组织中的启动子，并创建一个模型生物，其中 ntl-2 基因表达在组织特异性中被删除。方式。然而，尽管进行了多次实验，仍很难鉴定出每个组织中ntl-2基因的启动子。因此，我们不得不改变政策，决定从现在开始使用培养细胞进行分析。这个想法是将与患者具有相同突变的CNOT2基因引入培养的神经元中，确认表型，并与引入野生型CNOT2时的情况进行比较。基于这些结果，我们将讨论 CNOT2 在神经回路中的功能。他们还计划培育与患者具有相同突变或 CNOT2 缺失的模型小鼠，并分析它们的表型。