スクレロスチンの抑制による歯槽骨とセメント質を標的に新規歯周組織再生療法の開発

通过抑制硬化素开发针对牙槽骨和牙骨质的新型牙周组织再生疗法

基本信息

  • 批准号:
    21K09907
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

雄性SDラットを用いて咬合力排除モデル(対合歯抜歯)および咬合性外傷モデル(対合歯過高)で3日、5日、10日後に屠殺し、組織切片を作製し、病理組織学的変化を評価するためにHE染色を行った。咬合性外傷モデルは上顎の第一臼歯咬合面に1mm径のワイヤーを接着性レジンセメントにて接着し、下顎の大臼歯に強い咬合力をかけることにより咬合性外傷を誘導する。このモデルのラットHE染色組織標本を観察したところ、3日目から根分岐部に近接する歯槽骨にに硝子様変性を伴う強い吸収および多数の破骨細胞の多角の細胞の出現が認められた。この変化は5日目まで持続していたが、10日目には骨の再生が起こっており、破骨細胞様の多角の細胞がほとんど認められず、正常歯周組織との相違はほとんど認められなかった。TRAP染色を行った結果、3日、5日に認められた多角の細胞はTRAP陽性を示しており、破骨細胞であることを確認した。次にHE染色切片の写真を撮影し、PCソフトImageJにて形態計測を行った。根分岐部中隔から骨頂までの距離を計測し、骨吸収量を評価した結果、3日目および5日目に有意な距離の増加を認めたが、10日目には有意差は認めなかった。現在、同標本を用いて、スクレロスチンに対する免疫組織学的染色を行い、その発現の変化を経時的に検討している。また今後は抗スクレロスチン抗体製剤ロモソズマブを用いて咬合性外傷モデルにおけるスクレロスチンの抑制実験を行う予定で、これにより咬合性外傷の骨吸収におけるスクレロスチンの関与について証明を行う計画である。
咬合力排除模型(反对拔牙)和咬合创伤模型(反对牙齿过高)3、5、10天后处死雄性SD大鼠,制备组织切片,进行组织病理学检查。评估身体变化。在咬合创伤模型中,将一根直径为1 mm的钢丝用粘性树脂水门汀粘合到上颌第一磨牙的咬合面上,通过对下颌磨牙施加强大的咬合力来诱发咬合创伤。当我们观察该模型的大鼠HE染色组织标本时,从第三天开始,在牙根分叉附近的牙槽骨中观察到强烈的吸收,并伴有透明样变性和大量多边形破骨细胞的出现。这种变化一直持续到第5天,但到了第10天,骨已经发生再生,几乎看不到破骨细胞样的多角形细胞,与正常牙周组织几乎没有什么区别。 TRAP染色的结果,第3天和第5天观察到的多角形细胞为TRAP阳性,证实它们是破骨细胞。接下来,拍摄HE染色切片的照片,并使用PC软件ImageJ进行形态学测量。测量从根分叉隔膜到骨嵴的距离并评估骨吸收量的结果是,在第3天和第5天观察到距离显着增加,但在第10天没有观察到显着差异。塔。目前,我们正在使用同一标本对硬化蛋白进行免疫组织学染色,并检查其表达随时间的变化。未来,我们计划使用抗硬化蛋白抗体romosozumab在咬合创伤模型中进行抑制硬化蛋白的实验,并通过该实验证明硬化蛋白参与咬合创伤引起的骨吸收。

项目成果

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