特発性TGCV発症におけるATGL遺伝子領域のエピゲノム変化の解析

特发性TGCV发展中ATGL基因区域的表观基因组变化分析

基本信息

批准号：
20K11555
负责人：
原康洋
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

中性脂肪蓄積心筋血管症(TGCV)は、心筋と冠動脈へトリグリセリドが蓄積する難病であり、adipose triglyceride lipase(ATGL)の著減が主要な原因と考えられている。本研究は、その発症機構を明らかにするためにATGL遺伝子に欠損を持たない特発性TGCVにおいてATGL遺伝子が受けるエピジェネティックな抑制を調べることを目的としていた。その根底として特発性TGCVでもATGL発現が減少しているという仮説があったが、その後、特発性TGCVではATGL発現量に変化がなく酵素活性が減少していることが判明し方針変更となった。そこで特発性TGCVの発症に関わる新たなエピジェネティック研究のための検討を行った。（1）対象としてラット心筋細胞H9C2を候補とし脂質代謝の可視化の検討を行った。心臓検査に用いられている放射性標識した長鎖脂肪酸I123-BMIPPを蛍光標識に改変した蛍光BMPPを作製し、蛍光BMPPが細胞内に取り込まれ、その後、排出が起こることを確認した。同様にヒトHeLa細胞において蛍光BMPPが細胞内で代謝を受け、その取り込みが長鎖脂肪酸受容体であるCD36の阻害剤SSOに阻害されることを確認した。（2）特発性TGCVの発症に関わるエピジェネティック制御研究対象としてPNPLA3を候補とした。PNPLA3はATGLと同様のリパーゼファミリーに属し脂肪肝との関連が知られているが、心疾患との関連は報告されていない。そこで特発性TGCV患者検体を肝障害の有無に分け、ゲノムDNAについてPNPLA3遺伝子の変異解析を行った。肝障害検体に特異的な新たなPNPLA3遺伝子の変異は見られなかったが、欧米で非アルコール性脂肪性肝疾患との強い相関が知られるSNP_I148Mはすべての検体において見られた。

甘油三酸酯储存的心肌血管疾病（TGCV）是一种无法治愈的疾病，其中甘油三酸酯积聚在心肌和冠状动脉中，被认为是这种疾病的主要原因。这项研究旨在研究ATGL基因在特发性TGCV中经历ATGL基因缺陷的表观遗传抑制，以阐明其发作的机理。为此，有一个假设是特发性TGCV中也降低了ATGL表达，但后来发现特发性TGCV中ATGL表达水平没有变化，并且酶活性降低，从而导致策略变化。因此，我们进行了一项与特发性TGCV发作有关的新表观遗传学研究的研究。（1）我们使用大鼠心肌细胞H9C2作为受试者研究了脂质代谢的可视化。荧光BMPP是通过在心脏测试中用于荧光标签的放射性标记的长链脂肪酸I123-BMIPP来制备荧光BMPP，并确认将荧光BMPP吸收到细胞中并随后排泄。同样，已经证实，荧光BMPP在细胞内将荧光BMPP代谢，并且其摄取受到SSO的抑制，SSO是一种长链脂肪酸受体CD36的抑制剂。（2）PNPLA3是与特发性TGCV发作有关的表观遗传对照研究的候选。 PNPLA3属于与ATGL相同的脂肪酶家族，已知与脂肪肝有关，但尚无与心脏病相关。因此，将特发性TGCV患者的样品分为存在或不存在肝损伤，并在基因组DNA上对PNPLA3基因进行突变分析。在所有标本中都发现了与肝损伤标本特有的新的PNPLA3基因突变，但是SNP_I148M与西方的非酒精性脂肪肝病具有很强的相关性。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

長鎖脂肪酸アナログ-蛍光標識BMPP-の培養細胞を用いた特性解析

使用培养细胞表征长链脂肪酸类似物 - 荧光标记的 BMPP

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Aoshima Chihiro;Fujimoto Shinichiro;Kawaguchi Yuko O.;Dohi Tomotaka;Kamo Yuki;Takamura Kazuhisa;Hiki Makoto;Kato Yoshiteru;Okai Iwao;Okazaki Shinya;Kumamaru Kanako K.;Aoki Shigeki;Daida Hiroyuki;田辺賢一，山本健太，折式田彩，宮崎理加，熊谷美乃里，真子穂香，中村禎子，奥恒行;原康洋・平野賢一
通讯作者：
原康洋・平野賢一