不死化したヒト乳歯歯髄幹細胞の培養上清の基礎的解析と褥瘡マウスモデルの治療効果

永生化人乳牙牙髓干细胞培养上清的基础分析及对压疮小鼠模型的治疗作用

基本信息

  • 批准号:
    21K09779
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

2022年度は、褥瘡モデルマウスを用いて不死化した乳歯由来歯髄幹細胞の培養上清(SHED-CM)の潰瘍形成の抑制効果とその作用機序について検討を行った。① 褥瘡モデルマウスの治療効果:褥瘡モデルは、マウス背中の毛を剃った後、2つの円形磁石で皮膚を12時間挟み、その後、磁石を外してさらに12時間放置し、一過性虚血再灌流障害を誘導し潰瘍を形成させるモデルを用いた。虚血再灌流処置の5日後をピークに潰瘍が形成され、その程度を、経時的に皮膚潰瘍形成の様子を写真をとり、ImageJを用いて面積を算出し、比較検討した。無血清の培地で培養し回収したSHED-CM、および、そのコントロールとして無血清培地を、100 μlずつ左右の磁石を置いた周りに連日皮内注射すると、SHED-CM投与により潰瘍形成が有意に抑制された。次に、褥瘡形成のピークを過ぎた6日から投与してもその治療効果が見られた。② 褥瘡モデルマウスでの作用機序:SHED-CMの網羅的サイトカイン発現解析より発現の高かった肝細胞増殖因子(HGF)と血管内皮細胞増殖因子(VEGF)について、それぞれの特異的抗体を用いて免疫除去すると、コントロール抗体処理に比べ、有意に潰瘍形成抑制効果が減弱化した。この時、HGFの免疫除去により参加ストレスマーカー8-OHdG(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine)に対する抗体を用いた皮膚局所の免疫染色により酸化されたDNAの割合が軽減し、さらに、血管内皮細胞のマーカーCD31に対する抗体による免疫染色により新生血管の割合が低下していた。以上の結果より、SHED-CMは、虚血再灌流障害により誘導される潰瘍形成を、HGFとVEGFを介して抑制する可能性が示唆された。
2022年度,我们利用压疮模型小鼠研究了永生化乳牙源性牙髓干细胞(SHED-CM)培养上清液的溃疡形成抑制效果和作用机制。 ①压疮模型小鼠的治疗效果:对于压疮模型,将小鼠背部毛发剃除后,将皮肤夹在两个圆形磁铁之间12小时,然后除去磁铁,再放置12小时,以达到治疗目的。使用诱发短暂性缺血的模型,其中诱发灌注损伤并形成溃疡。缺血再灌注治疗后5天溃疡形成达到顶峰,通过拍摄随时间推移的皮肤溃疡形成照片并使用ImageJ计算面积来比较溃疡形成的程度。当连续几天在左磁体和右磁体周围皮内注射在无血清培养基中培养和收集的100μl SHED-CM和作为对照的无血清培养基时,SHED-CM的施用显着减少了溃疡形成。接下来,即使从压疮形成高峰后的第 6 天开始给药,也能看到治疗效果。 ②在压疮模型小鼠中的作用机制:使用SHED-CM综合细胞因子表达分析中高表达的肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮生长因子(VEGF),使用各自的特异性抗体进行检测。与对照抗体治疗相比,显着减弱了溃疡形成抑制作用。此时,通过使用抗参与应激标记物 8-OHdG(8-羟基-2'-脱氧鸟苷)的抗体进行皮肤局部免疫染色,HGF 的免疫耗竭降低了氧化 DNA 的比例,此外,使用抗参与应激标记物 8-OHdG(8-羟基-2'-脱氧鸟苷)的抗体对血管内皮细胞进行免疫染色,从而减少了氧化 DNA 的比例。标记物 CD31 显示新血管生成率下降。上述结果表明SHED-CM可能通过HGF和VEGF抑制缺血再灌注损伤引起的溃疡形成。

项目成果

期刊论文数量(15)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Preparation of a Bioadhesive Poly(Acrylic Acid)/Polyvinylpyrrolidone Complex Gel and Its Clinical Effect on Dental Hemostasis
生物粘附聚丙烯酸/聚乙烯吡咯烷酮复合凝胶的制备及其临床止血效果
  • DOI:
    10.3390/gels8080462
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.6
  • 作者:
    Ito Tomoko;Yamaguchi Shingo;Soga Daisuke;Yoshimoto Takayuki;Koyama Yoshiyuki
  • 通讯作者:
    Koyama Yoshiyuki
骨髄由来間葉系幹細胞の腫瘍増殖の抑制効果とその作用機序
骨髓间充质干细胞的肿瘤生长抑制作用及其机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    米戸敏彦;古阪悠馬;片平泰弘;宮川聡美;長谷川英哲;溝口出;善本隆之
  • 通讯作者:
    善本隆之
不死化したヒト脱落乳歯歯髄幹細胞(SHED-CM)培養上清の褥瘡モデルマウス皮膚潰瘍に対する治療効果
永生化人乳牙牙髓干细胞(SHED-CM)培养上清液对压疮模型小鼠皮肤溃疡的治疗作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    片平泰弘;長谷川英哲;井上槙也;古阪悠馬;坂本絵梨;渡邉有麻;関根碧水;宮川聡美;村上史浩;溝口 出;善本隆之
  • 通讯作者:
    善本隆之
Protective effect of conditioned media of immortalized stem cells from human exfoliated deciduous teeth on the formation of acute pressure ulcers via HGF and VEGF.
人脱落乳牙永生干细胞条件培养基通过 HGF 和 VEGF 对急性压疮形成的保护作用。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Katahira Y; Inoue S; Hasegawa H; Watanabe A; Mizoguchi I; Yoshimoto T.
  • 通讯作者:
    Yoshimoto T.
IL-23p19 and CD5 antigen-like form a possible heterodimeric cytokine and contribute to experimental autoimmune encephalomyelitis development.
IL-23p19 和 CD5 抗原样可能形成异二聚体细胞因子,并有助于实验性自身免疫性脑脊髓炎的发展。
  • DOI:
    10.1038/s41598-021-84624-9
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hasegawa H; Mizoguchi I; Orii N; Inoue S; Katahira Y; Yonteo T; Mingli X; Miyazaki T; Yoshimoto T
  • 通讯作者:
    Yoshimoto T
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    2022
  • 资助金额:
    $ 2.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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