Development of injectable adipose tissue ball (iPAT) for establishment of new breast reconstruction method

开发可注射脂肪组织球（iPAT）以建立新的乳房重建方法

基本信息

批准号：
21K09770
负责人：
素輪善弘
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto University (2022)Kyoto Prefectural University of Medicine (2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1.自己脂肪細胞組織由来の血管内皮細胞調整とこれを用いたiPAT作成:ALK5 inhibitorを添加することで血管内皮細胞の獲得効率を検討したところ、無添加群が1.2%の血管内皮細胞を採取できたのに対して、添加群では29.29%に向上した。次にこの自己脂肪組織由来の血管内皮細胞を用いて、HUVECと同様の手法でiPATを作成したところ、iPATと類似した脂肪組織ボールが作成可能であることを確認した。これまでと同様に、自己細胞由来のiPATをマウスの鼠径部に移植したところ、従来のiPATと同様に生着した。2週間後の移植組織の状態を示す。組織評価では、毛細血管レベルの血管構造が錯綜した脂肪細胞とその基質がみとめられた。2.iPATsの凍結保存に関しての成果:100個のiPATを2種類の凍結保存培地で冷凍保存し、7および30日後に解凍、再培養したところ良好な凍結保存能を有していることが示された。解凍後７日後に培養した複数のiPATの合体現象がみられた。またインスリン誘導後脂肪酸取り込み、HoechstおよびPIによりiPATの機能とバイアビリティが温存されていることを確認した。3.プロセスの自動化とスケールアップ、さらに大きなサイズの移植治療:iPATsのスケールアップ化のための大量培養装置が今回の研究目的に不適合であった点に苦労してきた。そのため、新規のバイオリアクターの購入を決め、深く検討した結果回転するバイオリアクターの中で培養血管付きボールを動かしながら球形のiPATを作成できるCellPet 3D-L (J-Tec)を２つ購入した。これによりiPATを量産することが可能となった。同時に、ディスペンサー装置によるバイオプリンティングを配備し、さらに効率、高速に産生効率を向上する工夫を重ねている。

1.自体脂肪细胞组织来源的血管内皮细胞的制备以及使用其创建iPAT：当检查通过添加ALK5抑制剂的血管内皮细胞的获得效率时，在非添加组中收集了1.2%的血管内皮细胞。添加组中，该比率提高至29.29%。接下来，使用这些自体脂肪组织来源的血管内皮细胞，通过类似于HUVEC的方法来创建iPAT，我们确认可以创建类似于iPAT的脂肪组织球。与过去一样，当将源自自体细胞的 iPAT 移植到小鼠腹股沟时，其植入方式与传统 iPAT 相同。显示两周后移植组织的状态。组织评估显示脂肪细胞及其基质在毛细血管水平具有复杂的血管结构。 2.关于iPAT冷冻保存的结果：将100个iPAT冷冻保存在两种类型的冷冻保存介质中，在7天和30天后解冻并重新培养，并显示出具有良好的冷冻保存能力。解冻7天后，观察到培养的多个iPAT聚结的现象。此外，我们证实胰岛素诱导后脂肪酸摄取、Hoechst 和 PI 可以保留 iPAT 的功能和活力。 3. 过程自动化和放大以及更大尺寸的移植治疗：我们一直在努力解决用于放大 iPAT 的大规模培养设备不适合本研究目的的事实。因此，我们决定购买一个新的生物反应器，经过深思熟虑，我们购买了两台CellPet 3D-L（J-Tec），它可以通过在旋转生物反应器内移动带有培养容器的球来创建球形iPAT。这使得 iPAT 的批量生产成为可能。同时，我们正在部署使用分配器装置的生物打印，并努力进一步提高生产效率和速度。