Searching for the mechanisms of vascular endothelial cell differentiation and choroidal neovascularization via B cell-related factor

通过B细胞相关因子寻找血管内皮细胞分化和脉络膜新生血管的机制

基本信息

批准号：
21K09699
负责人：
馬場高志
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1) パキコロイド血管新生黄斑症(Pachychoroid neovasuculopathy: PNV)と血管新生加齢黄斑変性(nAMD)の分子病態解析：患者由来の前房水を採取し、サイトカインプロフィールを取得した。サイトカインと患者背景および眼底所見について検討した。PNVではコントロールや他の病型よりも前房水IL-4レベルが高かった。IL-4レベルは、脈絡膜肥厚や脈絡膜血管拡張と関係した。ポリープ状病変がある症例では、IL-4レベルと病変数は関係した。IL-4に関係する遺伝子多型であるIL-4 -590(rs2243250)のTアレルの頻度は、PNVで高く、脈絡膜肥厚や脈絡膜血管拡張と関係した。2) レーザー誘発脈絡膜血管新生(L-CNV)モデルによるB細胞からの疾患関連因子：B6.129S2-Ighm<tm1Cgn>/Jマウス(muMt)とC57BL6/Jマウス(wt)を用いて、L-CNVモデルを作成した。B細胞を欠くmuMtは、B細胞があるwtと比較してCNVサイズは抑制された。B細胞がどのようにCNV増生に関与しているのか明らかにするため、B細胞キメラマウスのL-CNVモデルを用いて解析した。wtマウスB細胞をmuMtマウスに移植した。muMtマウスで抑制されたCNVサイズはwtマウス由来B細胞を移植することにより回復した。また、因子X欠損マウス由来B細胞を移植すると、wtマウス由来B細胞を移植した場合と比較して、CNVサイズの回復はなかった。標識B細胞を用いて、CNVを増大する作用が、B細胞による眼局所での働きか、全身で他のエフェクター細胞を介する間接的な作用によるものかを調べるため、GFPマウス由来B細胞をmuMtマウスに移植した。標識B細胞は、CNVに集簇し、その後、体循環に戻った。標識B細胞が発現する分子を確認した。

1）粗脉络膜新生血管病（PNV）和新生血管性年龄相关性黄斑变性（nAMD）的分子病理学分析：收集患者前房水并获得细胞因子谱。对细胞因子、患者背景和眼底检查结果进行了调查。 PNV 患者前房水 IL-4 水平高于对照组和其他疾病类型。 IL-4水平与脉络膜增厚和脉络膜血管舒张相关。在息肉样病变的病例中，IL-4 水平与病变数量相关。 IL-4 -590 (rs2243250) 的 T 等位基因（一种与 IL-4 相关的遗传多态性）的频率在 PNV 中较高，并且与脉络膜增厚和脉络膜血管舒张相关。 2)使用激光诱导脉络膜新生血管(L-CNV)模型衍生自B细胞的疾病相关因子：创建了L-A CNV模型。与含有 B 细胞的 wt 相比，缺少 B 细胞的 muMt 抑制了 CNV 大小。为了阐明 B 细胞如何参与 CNV 增殖，我们分析了 B 细胞嵌合小鼠的 L-CNV 模型。将Wt小鼠B细胞移植到muMt小鼠中。 muMt 小鼠中受抑制的 CNV 大小通过移植来自 wt 小鼠的 B 细胞得以恢复。此外，当移植来自X因子缺陷小鼠的B细胞时，与移植来自野生型小鼠的B细胞相比，CNV大小没有恢复。使用标记的 B 细胞，我们研究了 CNV 增加的效果是由于眼睛中 B 细胞的局部作用还是通过移植到小鼠体内的其他效应细胞的间接作用。标记的 B 细胞聚集成 CNV，然后返回体循环。我们确认了标记 B 细胞表达的分子。